同种异体气管移植再上皮化的实验研究

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目的:探讨在异位气管移植中,大鼠气管上皮细胞再生形成分化和功能良好上皮的动态过程。方法:实验分实验组和对照组,胰酶消化法去除气管上皮细胞,实验组灌注气管上皮细胞,对照组灌注生理盐水,再将两组气管异位移植到SD大鼠背部皮下,全程环孢菌素A腹腔注射处理。移植后1、2、3、4周杀死大鼠,取出气管。形态学评价气道上皮的完整性、分化程度、粘膜下炎症细胞浸润、纤维组织增生和管腔闭塞情况。免疫组化CK14、CK18和CFTR鉴定气道上皮细胞分化;Ki-67鉴定上皮细胞增殖情况。扫描电镜和透射电镜观察超微结构改变。结果:形态学:移植后1周,气管壁大部分可见不连续扁平上皮覆盖,局部无上皮,无纤毛结构;移植后2周,气管壁全层可见较连续的扁平上皮覆盖,局部可见柱状上皮,无纤毛结构;移植后3周,气管壁全层可见较连续的柱状上皮覆盖,局部可见纤毛结构;移植后4周,气管壁全层可见连续的纤毛柱状上皮覆盖。对照组气管壁无上皮细胞覆盖,管腔中大量炎症细胞浸润。CK14和CK18于术后第1、2、3、4周4个时间点的气管上均有表达;CFTR只在第4周气管上表达。术后第1周Ki-67表达最强,后表达逐渐下降。扫描电镜:从术后第1周上皮覆盖大部分气管壁到第4周形成分化完全的假复层纤毛柱状上皮;透射电镜第1周可见扁平上皮,第4周可见纤毛上皮结构完整,细胞连接紧密。结论:大鼠气管上皮细胞灌注到裸气管异位移植到大鼠背部皮下,可再生成分化完全和有功能的气道上皮;气管上皮再生过程包括:细胞附壁、细胞增殖、细胞分化、成熟上皮形成。
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