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目的：间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)的免疫调节作用颇受关注,MSCs移植可望成为治疗自身免疫性疾病和抗移植排斥反应的重要途径。本实验旨在通过体外实验,探讨人羊膜间充质干细胞(human amnion mesenchymal stem cells, hAMSCs)对异基因淋巴细胞的增殖抑制效应和T细胞亚群调节作用的机制。方法：①酶消化法分离培养hAMSCs,流式细胞术(flow cytometry, FCM)和免疫组织化学(Immunohistochemical, IHC)染色鉴定hAMSCs的表型特征。②密度梯度离心分离人外周血单个核细胞(PBMCs),丝裂霉素处理的hAMSCs,实验设hAMSCs+PBMCs+PHA-P+RPMI-1640培养基、hAMSCs+PBMCs+PHA-P+RPMI-1640培养基+抗人TGF-β1单抗、PBMCs+PHA-P+RPMI-1640培养基、hAMSCs+PHA-P+RPMI-1640培养基和RPMI-1640培养基共5组,培养96h后行MTT法检测各组光密度值,计算淋巴细胞增殖抑制率(inhibitory rate, IR)。③hAMSCs对T淋巴细胞亚群影响实验设hAMSCs+PBMCs组、]AMSCs+PBMCs+抗人TGF-β1单抗组和PBMCs组,培养48h后通过FCM检测Treg、Th1、Th2、 CTL1、CTL2、Th17细胞亚群。④酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组培养物上清中TGF-β1、IFN-γ、IL-2、IL-4的含量。结果：①分离培养的第3代hAMSCs高表达CD44、CD73、CD90及CD105,不表达CD34、CD45、CD14、CD19、CD80、CD86和HLA-DR,波形蛋白阳性,不表达CK19。②hAMSCs和PBMCs共培养后,与单独PBMCs组比较OD值明显下降,淋巴细胞IR达94.36±15.28%(P<0.01)；加入抗TGF-β1单抗后,OD值明显高于共培养组(P<0.05),R明显下降(P<0.01)。③AMSCs和PBMCs共培养后,Treg细胞亚群百分比较单独PBMCs明显升高(P<0.05),Thl、Tc1和Th17亚群百分比明显下降(均P<0.05)；加入抗TGF-β1单抗后,Thl、Th2、Tc1、Tc2亚群百分比明显上调(均P<0.05),而Treg细胞百分比则明显下调(P<0.01)。④ELISA检测结果显示,单独hAMSCs或单独PBMCs培养的上清液中均可检出一定量的TGF-β1或IFN-γ; hAMSCs和PBMCs共培养上清中TGF-p1含量显著升高,IFN-γ明显下降(均P<0.01)；在共培养组中加入抗TGF-p1mAb后,TGF-p1和IFN-γ含量均明显减少(均P<0.01)。结论：AMSCs可抑制异基因淋巴细胞增殖,能诱导CD4+FOXP3+Treg细胞生成和抑制Thl、Th17、Tel细胞,TGF-β信号通路的激活是其免疫调节作用的重要机制之一。