【目的】乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且发病率呈逐年上升趋势，严重威胁着妇女的健康和生命。早期诊断、早期治疗是乳腺癌防治的关键。乳腺导管内增生性病变和乳腺癌的发生发展密切相关，其发生乳腺癌的风险较正常者有不同程度的增加。近来DNA甲基化是乳腺早期癌变研究的热点之一，许多研究证实DNA高甲基化与乳腺癌的发生密切相关，但由于基因甲基化有肿瘤特异性，当前尚无较好的甲基化谱来应用于乳腺癌的临床诊断。目前对导管内增生性病变到乳腺癌的发展过程中基因甲基化的研究还很少见。本实验选择细胞周期蛋白D2(cyclin D2)和HIN-1(high in normal-1)两种候选抑癌基因，通过检测乳腺普通型增生(usual ductal hyperplasia，UDH)、不典型增生(atypical ductal hyperplasia，ADH)、原位癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)及浸润性癌(invasive breast cancer,IBC)中这两种基因甲基化，比较不同组织中cyclinD2、HIN-1基因的甲基化率并进行研究分析，一方面期望可以了解这两种基因的甲基化与乳腺癌发生发展的关系，探讨这两种基因甲基化与乳腺癌癌变与演进的相关性，另一方面希望为乳腺癌基因甲基化谱的选择提供一个参考，为乳腺癌的早期诊断、预防和治疗提供理论依据。【方法】选取山东大学齐鲁医院2002～2005年64例外科手术切除标本，根据2003年WHO乳腺肿瘤病理诊断标准对所选病例的HE组织切片进行复习以确定诊断。其中44例乳腺导管内增生性病变(包括UDH 12例，ADH 8例，DCIS 24例)及14例浸润性乳腺癌病例和6例乳腺正常组织，用DNA抽提试剂盒对所有病例的石蜡包埋组织提取基因组DNA，采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR，MSP)检测cyclinD2、HIN-1基因的甲基化率。用SPSS13.0统计软件包进行分析。【结果】正常乳腺组织、UDH、ADH、DCIS和IBC中，cyclin D2基因甲基化率分别为0％(0／6)、25.0％(3／12)、37.5％(3／8)、66.7％(16／24)和78.6％(11／14)，HIN-1基因在正常乳腺组织、ADH、DCIS和IBC中甲基化率分别为0(0／6)、16.7％(2／12)、37.5％(3／8)、62.5％(15／24)和85.7％(12／14)，经统计学分析显示，正常组织与DCIS、正常组织与IBC、UDH与DCIS、UDH与IBC之间cyclinD2基因甲基化率差别有统计学意义(P＜0.05)，其余各组之间无显著性差异(P＞0.05)。同cyclin D2相似，正常组织中HIN-1基因甲基化率与DCIS和IBC相比有显著性差异(P＜0.05)，UDH与DCIS、IBC相比有显著性差异(P＜0.05)，其余各组之间甲基化率无显著性差异(P＞0.05)。在从正常、UDH、ADH、DCIS到IBC的发展过程中，cyclin D2、HIN-1基因甲基化率均逐渐增加，统计学分析呈线性相关(P＜0.001)。分析各组中cyclin D2和HIN-1基因综合甲基化情况，结果为6例正常组织中cyclin D2和HIN-1均未发生甲基化，25.0％(3／12)UDH至少发生一个基因甲基化，50.0％(4／8)ADH至少发生一个基因甲基化，DCIS为87.5％(21／24)，IBC为92.9％(13／14)，正常组织与DCIS、IBC之间，UDH与DCIS、IBC之间，以及ADH与DCIS、IBC之间甲基化率差别均有统计学意义(P＜0.05)。在正常、UDH、ADH、DCIS和IBC发展过程中，两个基因至少发生一个甲基化的几率逐步增高，统计学分析呈线性相关(P＜0.001)。相关性分析显示cyclin D2和HIN-1基因甲基化之间呈正相关性(r=0.469，P＜0.001)。【结论】1．乳腺正常组织中cyclin D2和HIN-1基因均未发现甲基化，而在DCIS和IBC这两种病变中呈高甲基化，且正常组织中甲基化率与DCIS、IBC之间差别具有显著性意义，提示cyclin D2、HIN-1基因甲基化在乳腺癌发生过程中起着一定的作用。2．UDH和ADH中cyclin D2、HIN-1基因有一定程度的甲基化，提示这两种基因甲基化是乳腺癌发生中的早期事件，其蓄积可能促进乳腺癌的恶性转化。3．cyclinD2和HIN-1基因甲基化联合分析可以更好的体现DNA高甲基化与乳腺癌发生发展的关系。cyclin D2基因甲基化和HIN-1基因甲基化之间呈显著正相关，提示可以把两者结合起来组成甲基化谱用于乳腺癌的早期诊断或进行风险评价。而去甲基化的应用，可能对乳腺癌的早期预防有一定的作用。