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目的:探讨TGFβ1siRNA对TGFβ1基因表达的干扰作用,为进一步深入研究TGFβ1与高氧肺损伤发生发展机理提供一种新的工具;为研究早产儿CLD的基因治疗方法提供依据。方法:针对大鼠TGFβ1基因mRNA序列,设计、合成携带3条TGFβ1siRNA和TGFβ1基因的绿色荧光蛋白融合表达质粒载体,并设阴性质粒组和空质粒组为对照,通过脂质体包裹分别转染293细胞。转染后24h、48h和72h收集细胞,在荧光显微镜下观察干扰效果,采用荧光定量PCR检测TGFβ1基因表达情况,并计算干扰效率。结果:(1)成功设计并构建出携带大鼠TGFβ1siRNA和TGFβ1的绿色荧光蛋白融合表达质粒载体。(2)脂质体包裹质粒转染293细胞后在荧光显微镜下观察,可见转染后24h、48h和72h TGFβ1siRNA质粒组细胞绿色荧光强度均明显弱于阴性质粒组细胞,空质粒载体组未产生绿色荧光。(3)荧光定量PCR检测转染后293细胞TGFβ1mRNA表达量,其中转染后48h阴性质粒组表达量最高(P<0.05),转染后24hTGFβ1siRNA质粒组表达量最低(P<0.05),空质粒组未见TGFβ1mRNA表达;转染后24h、48h和72h TGFβ1siRNA质粒组TGFβ1mRNA表达量均显著低于阴性质粒组(P<0.01),其基因干扰效率则依次递减,分别为97.2%、97.1%和67.7%。结论:研究证明自行设计的TGFβ1siRNA转染293细胞后24h、48h和72hTGFβ1siRNA均能够高效干扰TGFβ1基因的表达,其基因干扰效率随转染后时间的增加而递减。