【摘 要】
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目的探讨人参皂苷Rg1处理对大鼠脑缺血再灌注(cerebral ischemia reperfusion,CIR)损伤后Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、磷酸化核转录因子κB p65(Phosphorylated nuclear transcription factorκB p65,Phos-NFκB p65)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis fact
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目的探讨人参皂苷Rg1处理对大鼠脑缺血再灌注(cerebral ischemia reperfusion,CIR)损伤后Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、磷酸化核转录因子κB p65(Phosphorylated nuclear transcription factorκB p65,Phos-NFκB p65)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)在各组脑组织中的表达情况,以阐明人参皂苷Rg1对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞坏死的影响机制。方法取健康的雄性大鼠随机分为四组,分别是假手术组(sham)、缺血再灌注组(model)、人参皂苷Rg1组(Rg1),Necrostaitin对照组(Nec-1),每组9只。采用大脑中动脉栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)2h后再灌注24h的方法制备大鼠大脑缺血再灌注的模型。通过观察各组实验大鼠的神经功能缺损评分、测定脑组织的含水量以及2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色结果来鉴定模型是否成功。采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6的表达水平。采用石蜡切片HE染色法观察各组的病理学改变。采用免疫印迹法来检测脑组织TLR4、Phos-NFκBp65、TNF-α的表达。结果除sham组外,其它组大鼠均出现明显的神经功能缺损症状、脑梗塞灶及脑水肿症状。与model组相比,Rg1和Nec-1处理组梗死灶体积显著减小,脑水肿显著减轻;但Rg1和Nec-1两组之间无显著差异;ELISA结果显示,与sham组相比,model组的TNF-α、IL-6显著增高,而Rg1、Nec-1处理后水平显著减轻,但Rg1、Nec-1两组间无显著差异;光镜观察sham组神经细胞排列规则,细胞结构正常。Model组细胞间质疏松,细胞水肿,部分神经元变性坏死,呈三角形。而Rg1、Nec-1两组病理情况较model组有所改善。免疫印迹结果显示,model组中可见明显的TLR4、Phos-NFκBp65、TNF-α蛋白表达条带,统计结果显示显著高于假手术组;与model组比较,Rg1组、Nec-1组的TLR4、Phos-NFκBp65、TNF-α水平均显著降低;而Rg1组与Nec-1对照组之间无显著差异。结论人参皂苷Rg1可能通过抑制TLR4/NFκBp65通路的激活,从而抑制TNF-α、IL-6的表达,减少细胞坏死,减轻脑梗塞和脑水肿症状,从而发挥脑保护的作用。
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