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背景转录因子Sal like protein 2(Sall2,p150sal2或hsal2)是SALL2基因的产物,是一种多锌指结构转录因子。在人类卵巢上皮肿瘤细胞中,Sall2能够识别结合p21Cip1/Waf1和BAX的启动子的GC-box,抑制细胞生长并诱导细胞凋亡。Sall2的DNA结合位点是GGG(T/C)GGG,属于Sp1转录因子家族。而Sp1可通过结合yu于p16INK4A(p16或MTS1)启动子的GC-boxes促进其表达。p16是重要的抑癌基因,它在细胞周期、细胞衰老、肿瘤发展中都起到重要的作用。癌基因、DNA损伤和衰老等都可诱导p16的表达。p16主要通过抑制细胞周期和促进细胞凋亡来抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。目的本研究旨在研究:Sall2对p16的表达的调节作用;Sall2通过p16启动子的特定片段调节p16的表达;Sall2通过结合在这个片段的特定DNA序列调节p16的表达以及Sall2对p16表达调节的生物学功能。通过这些研究可揭示Sall2基因新的下游靶基因并阐明Sall2在肿瘤形成中的作用。方法用基因芯片检测筛选出Sall2的下游靶基因后,选取p16等与肿瘤相关的基因进一步做启动子报告基因检测;对p16启动子进行缺失突变后,用启动子报告基因检测确定Sall2在p16启动子的结合位点;用p16 minigene和p16 RNAi转染到细胞后,通过FACS方法确认Sall2促进其下游靶基因p16的表达所产生的生物学功能。结果通过芯片分析显示Sall2能够上调p16等抑癌基因的表达,下调c-myc等癌基因的表达;通过报告基因检测确认了Sall2对p16的上调作用。Sall2可结合于p16的启动子近端位点GGGTGGG并诱导p16启动子的活性;Sall2的第3个锌指结构对上调p16启动子活性起到决定性作用。Sall2对p16的诱导表达可引起细胞周期的阻滞;敲降p16后Sall2抑制细胞周期的能力显著降低。结论Sall2通过第三锌指结构作用于p16近端启动子上的GGGTGGG序列,上调p16的表达,抑制细胞周期。本论文阐述了Sall2新的重要的下游靶基因,说明Sall2在肿瘤中的重要作用,提示靶向增强Sall2的表达在肿瘤治疗中的重要作用,为发现新型药物靶点提供了新的线索。