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牙周病是人类口腔中两大最常见的疾病之一,也是成年人失牙的首位原因。牙菌斑生物膜的细菌及其产物是引发牙周病必要的始动因子。如何抑制菌斑形成和清除菌斑是控制牙周病的重要议题。生物活性玻璃(bioactive glass,BG)是由Hench教授1969年发明,由Si O2,Na2O,Ca O,P2O5等氧化物组成,具有生物活性的新型生物材料。生物活性玻璃已证实能够有效封闭牙本质小管,治疗牙本质过敏症、作为骨替代材料等。生物活性玻璃同时也具有广泛的抗菌作用。但是对于生物玻璃对菌斑的抗菌效果研究,特别是对引起牙周病的龈下菌斑的研究目前并不多见。本实验旨在探究生物活性玻璃对三种细菌的抑制和杀灭能力,并于体外模拟三种单菌种菌斑和早期龈下混合菌斑,探究生物活性玻璃对其抗菌效果。对比生物活性玻璃与无机抗菌剂氯己定的抗菌效果,探讨生物活性玻璃的抗菌成效,为临床应用提供依据。第一部分生物活性玻璃对三种细菌的抗菌效果研究目的研究生物活性玻璃作用于浮游状态和菌斑生物膜状态的血链球菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌的抗菌效果,对比两种不同状态下细菌对生物活性玻璃的易感性。方法测定生物活性玻璃对血链球菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌的浮游状态细菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC)。于菌斑玻片上制作三种细菌的单菌种菌斑生物膜模型,并测定生物活性玻璃对生物膜状态的三种细菌的最小菌斑清除浓度(minimal biofilm eradication concentration,MBEC)。结果低浓度的生物活性玻璃能够产生抑菌杀菌作用,生物活性玻璃对菌斑的MBEC明显大于对浮游菌的MIC和MBC,MBEC为MIC的2~16倍。结论生物活性玻璃可抑制和杀灭血链球菌、聚合梭杆菌、伴放线放线杆菌浮游菌及其单菌种菌斑生物膜,对浮游细菌效果优于菌斑生物膜。第二部分激光共聚焦扫描显微镜观察生物活性玻璃对24h早期龈下混合菌斑的抗菌效果研究目的探究生物活性玻璃对三种细菌形成的24h早期龈下混合菌斑的抗菌效果。方法于载玻片上模拟形成24h早期龈下混合菌斑,20、40、80 mg/mL的生物活性玻璃和惰性玻璃二氧化硅(Si O2)处理后染色,于激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)下摄片观察分析生物膜厚度和平均荧光强度。结果随着生物活性玻璃浓度加大,混合菌斑生物膜厚度变薄,团块减小,菌斑活性比减低,与空白对照组和阳性对照Si O2组有显著统计学差异(P<0.05)。结论生物活性玻璃对早期龈下混合菌斑有一定抗菌效果,且浓度越高,抗菌效果越好。第三部分生物活性玻璃与氯己定对伴放线放线杆菌抗菌效果对比目的对比生物活性玻璃与氯己定(Chlorhexidine,CHX)对伴放线放线杆菌的抗菌效果方法测定生物活性玻璃和氯己定对伴放线放线杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)、最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC)和最小菌斑清除浓度(minimal biofilm eradication concentration,MBEC)。于玻片上培养形成伴放线放线杆菌单菌种菌斑生物膜,1/2MBEC和1MBEC的生物活性玻璃和氯己定作用于菌斑10min,平板计数观察细菌活性。结果生物活性玻璃和氯己定的MBEC大于对浮游菌的MIC和MBC,MBEC为各自MIC的4倍和8倍,1MBEC作用下生物活性玻璃与氯己定组细菌计数结果有统计学差异(<0.05),生物活性玻璃组菌斑活性低于氯己定组;1/2MBEC组对比无统计学差异。结论低浓度生物活性玻璃和氯己定即可对伴放线放线杆菌产生抗菌效果,生物活性玻璃对菌斑生物膜的抗菌效果要优于氯己定。