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研究背景:心脏骤停(cardiac arrest,CA)是常见的严重临床事件,但心脏骤停患者的出院存活率一直很低,2015年在美国仅约为10.6%。复苏后心功能不全(post-resuscitation myocardial dysfunction,PRMD)为初期自主循环恢复(restoration of spontaneous circulation,ROSC)后早期死亡的主要原因之一。有研究发现,复苏后3 d大鼠的心脏彩超提示仍存在舒张功能障碍为主的心功能不全,且该舒张性心功能不全严重程度与生存时间成负相关。HE染色进一步发现复苏后3 d存在心室壁内层间质增生,提示出现有心肌纤维增生。心肌纤维化是导致心脏顺应性降低,舒张性心力衰竭的重要病理机制之一。血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)通过活化血小板源生长因子受体(platelet-derived growth factor receptor,PDGFR),进而激活细胞内一系列信号转导通路,在多器官纤维化的过程中起重要作用,但其在复苏后心肌间质增生中的作用仍不明确。研究目的:研究PDGF-D/PDGFR-β信号通路在大鼠心肺复苏后心肌间质纤维增生中的作用机制。研究方法:1.PDGF-D/PDGFR-β信号通路在大鼠心肺复苏后心肌间质纤维增生中的作用机制研究(1)实验分组90只雄性SD大鼠,随机分为5组:假手术组(Sham)、对照组(Control)、伊马替尼组(Imatinib)、腺病毒GFP组(Ad-GFP)和腺病毒PDGFR组(Ad-PDGFR)。采用室颤法诱导心肺复苏模型,每组再分为复苏后(post-resuscitation,PR)4 h和PR72 h两个亚组。(2)HE染色观察病理变化分别在复苏后4h、72h处死大鼠,取大鼠心脏组织制作切片,HE染色。(3)天狼猩红染色测心肌胶原容积分数(Collagen volume fraction,CVF)取大鼠心脏组织切片,天狼猩红染色。采用Leica显微镜照相系统拍照,利用Image J 1.8.0图像分析软件分析并测量大鼠CVF即心肌间质原面积/视野总面积比值。(4)血清PDGF-D水平检测到观察时间截点,经大鼠心脏取血,离心后采用ELISA检测PDGF-D水平。(5)Western blot检测CollagenⅠ、α-SMA、Vimentin和PDGFR-β表达Western blot检测CollagenⅠ、α-SMA、Vimentin和PDGFR-β表达。结果:1.HE染色,Sham组心肌细胞排列紧密有序,细胞核形态完整。除Sham组外,各组PR4h,可见心肌细胞肿胀,部分肌细胞溶解,心肌细胞排列紊乱。除Sham组外各组PR72h,可见心肌细胞排列紊乱,各组均有不同程度间质增生。2.在PR72 h,Control组CVF值显著高于Sham组[(11.24±0.31)vs(1.65±0.19),(t=10.81,P<0.05)],Ad-PDGFR组显著高于Ad-GFP组[(25.60±4.09)vs(10.73±2.42),(t=16.77,P<0.05)],Imatinib组显著低于Control组[(5.11±0.29)vs(11.24±0.31),(t=3.892,P<0.05)]3.在PR4h,Control组、Imatinib组、Ad-GFP组及Ad-PDGFR组PDGF-D表达较Sham组显著增加(均P<0.05);在PR72h,Ad-PDGFR组PDGF-D表达仍较Sham组显著增加[(296.46±30.82)pg/ml vs(93.74±5.43)pg/ml,(t=7.755,P<0.05)]。4.在PR72h,Control组CollagenⅠ、α-SMA、Vimentin和PDGFR-β表达较Sham组显著增加,Ad-PDGFR组上述蛋白表达均较Ad-GFP组显著增加,Imatinib组的较Control组显著下降(均P<0.05)。结论:1.心肺复苏后大鼠血清中PDGF-D表达量增加,PDGF-D/PDGFR-β信号通路活化了成纤维细胞。成纤维细胞转为肌成纤维细胞分泌CollagenⅠ等ECM,造成了大鼠心肌间质的增生。2.Imatinib可以减轻心肺复苏后PDGF-D/PDGFR-β信号通路引起的心肌间质增生。