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目的研究临床分离布伦登卢普沙门菌的抗菌药物敏感性、分子分型、氟喹诺酮耐药机制和毒力基因,为了解布伦登卢普沙门菌在本地区的流行趋势、预防与控制其感染以及临床合理使用抗菌药物提供依据。方法1.收集2012至2014年每年4-10月我市两家教学医院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料,并且采集患者粪便标本进行沙门菌分离培养、生化和PCR鉴定及血清型分型。2.对鉴定得到的布伦登卢普沙门菌采用微量肉汤稀释法和K-B法进行14种抗菌药物敏感性检测。3.分子分型:进行多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)。4.氟喹诺酮耐药基因分析:PCR扩增氟喹诺酮靶位基因gyrA、gyrB、parC和parE的QRDR(喹诺酮耐药决定区)并测序,对序列进行Blast分析;PCR检测质粒介导的氟喹诺酮耐药基因qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、oqxAB和acc(6’)-Ib-cr。5.毒力基因检测:对沙门菌毒力基因岛(SPI)的代表性基因进行PCR检测,包括SPI1(sitC和hilA)、SPI2(sseL和sifA)、SPI3(mgtC)、SPI4(siiE)、SPI5(sopB)、SPI6(pagN)、SPI9(bapA)、SPI10(sefA)、SPI11(pagC)、SPI12(sspH2)和SPI调节基因(phoP)。结果1.共分离到布伦登卢普沙门菌8株,占同期全部153株非伤寒沙门菌的5.23%。2.8株布伦登卢普沙门菌对萘啶酸耐药率100%,对环丙沙星和左氧氟沙星中介耐药率100%,对氨苄西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢呋辛、庆大霉素、链霉素、四环素、氯霉素等抗菌药物都敏感。3.8例布伦登卢普沙门菌感染病例包括2012年1例、2013年2例和2014年5例,男女比例为5:3,年龄为25-62岁,临床诊断均为急性胃肠炎。4.以相似度100%为标准,8株布伦登卢普沙门菌经XbaⅠ酶切后得到2种PFGE带型,A型7株,B型1株。A型和B型相似度很高,为97.3%。5.8株布伦登卢普沙门菌的7个管家基因hisD、dnaN、hemD、aroC、purE、sucA和thrA的等位基因谱完全相同,依次为14、2、15、12、11、14和16,均为ST22型。6.与对氟喹诺酮敏感的布伦登卢普沙门菌H9812相比,8株氟喹诺酮中介耐药的布伦登卢普沙门菌临床株都出现了相同的gyrA基因QRDR有义突变,即编码87位氨基酸的密码子GAC→UAC,导致Asp(天冬氨酸)→Tyr(酪氨酸),gyrB、parC和parE的QRDR未发现有义突变。8株布伦登卢普沙门菌均未检测出qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、oqxAB和acc(6’)-Ib-cr基因。7.8株布伦登卢普沙门菌微量肉汤稀释法显示环丙沙星和左氧氟沙星100%中介耐药,环丙沙星K-B法显示50%(4株)敏感,50%(4株)中介耐药。8.8株布伦登卢普沙门菌的毒力基因sitC、hilA、sseL、sifA、mgtC、siiE、sopB、pagN、bapA、pagC、sspH2和phoP都阳性,sefA都阴性。结论1.本研究中的布伦登卢普沙门菌耐药表型、MLST分型和gyrA的QRDR突变完全相同,PFGE为同一克隆或极其相似,我市可能出现了ST22型氟喹诺酮耐药的布伦登卢普沙门菌感染暴发。2.我市连续3年检出布伦登卢普沙门菌临床株,分离率明显高于国内其它地区,可能由感染暴发所致。3.环丙沙星K-B法错误地显示某些氟喹诺酮中介耐药株为敏感,临床应注意K-B法可能会误导治疗NTS感染用药的选择。4.布伦登卢普沙门菌临床株携带SPI1、2、3、4、5、6、9、11、12毒力基因和调节基因,推测其具有较强的致病能力。5.本地区应持续开展非伤寒沙门菌的监测和研究,并应加入我国细菌分子分型电子网络