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鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)是斑点叉尾鮰肠道败血症的病原,在世界范围内都有流行,给斑点叉尾鮰养殖业造成了巨大的经济损失。研制高效安全的疫苗预防该病一直以来是研究的重点。菌蜕疫苗是革兰氏阴性菌被噬菌体phix174裂解基因E表达蛋白裂解后形成的不含胞质内含物的细菌空壳,它保持了活菌完整的细胞形态,具有与活菌相同的抗原结构,是一种高效安全的新型疫苗。本研究通过构建含有噬菌体phix174裂解基因E的质粒pBV-lysisE,并将其导入到鮰爱德华氏菌内,通过温度诱导首次制备了鮰爱德华氏菌菌蜕疫苗,并应用该菌蜕疫苗免疫健康斑点叉尾鮰,研究了斑点叉尾鮰外周血免疫指标的变化规律与免疫保护效果。主要结果如下：]鮰爱德华氏菌菌蜕疫苗候选菌株的鉴定通过Biolog全自动微生物鉴定、16S rDNA序列比对等方法进行了斑点叉尾鮰爱德华氏菌疫苗候选株的鉴定,确定为蛔爱德华氏菌。人工感染实验证明该菌对斑点叉尾鮰有致病性,其LD50为1×105.785cfu。2鮰爱德华氏菌菌蜕疫苗的构建利用基因克隆的方法将噬菌体phix174裂解基因E克隆到表达载体pBV220上,并将其导入到蛔爱德华氏菌CH01内,通过升温诱导裂解基因E表达,成功制备出鮰爱德华氏菌菌蜕。溶菌动力学实验结果显示,诱导开始后1h,菌液OD600升高,诱导2h后,由于鮰爱德华氏菌裂解,OD600值缓慢降低,直到8h后趋于平稳；裂解效率达99.997%,且真空冷冻干燥后,涂布BHI平板无活菌生长。3鮰爱德华氏菌菌蜕对斑点叉尾鮰免疫保护将鮰爱德华氏菌菌蜕(EIG)和福尔马林灭活的鮰爱德华氏菌(FKC)作为免疫原,通过腹腔注射途径分别免疫健康的斑点叉尾鮰。结果显示：EIG和FKC两种免疫原都能诱导斑点叉尾鮰外周血红细胞,白细胞数量增加,并引起不同种类白细胞组成比例变化,提高吞噬活性。EIG组斑点叉尾鮰白细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞数量均显著高于FKC组和对照组(P<0.05)；EIG组吞噬指数和吞噬百分比和FKC组与对照组相比差异显著(P<0.05)。EIG免疫组血清抗体凝集效价在第21天达到峰值1：682.67,显著高于FKC免疫组(1：341.33)。攻毒后,EIG免疫组相对免疫保护率达到了89.3%,显著高于FKC免疫组(64.5%)(P<0.05)。EIG组和FKC组均能诱导斑点义尾鮰产生免疫反应,但是EIG诱导斑点义尾鮰产生更强烈的免疫应答反应,具有更好的免疫原性