加压毛细管电色谱（pressurized capillary electrochromatography,pCEC）具有高柱效、高分辨度、高选择性以及速度快等优点,其与高灵敏度的激光诱导荧光检测器（Laser induced fluorescence detector,LIF）联用,在痕量检测上具有明显优势;超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS-MS）则可提供分子量及结构信息。本研究以pCEC-LIF为平台,UPLC-MS-MS为鉴定手段,考察了具有自发荧光性质的维生素B₂的光稳定性,研究了原盐效应对维生素B₂光降解的影响,并尝试对其光降解化合物进行结构推断。同时,对自身无荧光的微囊藻毒素进行荧光修饰,对荧光修饰后的微囊藻毒素进行质谱表征,并在pCEC-LIF上得到分离分析。本论文共分为五个部分:第一章为前言,主要介绍了课题的背景及研究现状,包括超高效液相色谱、质谱、加压毛细管电色谱、激光诱导荧光检测器的原理;荧光的产生及荧光修饰技术;药物稳定性和维生素B₂的光降解特性以及微囊藻毒素的检测方法等内容。第二章是以加压毛细管电色谱-激光诱导荧光联用技术为平台,研究了离子强度对维生素B₂光解反应。首先在pCEC-LIF上建立了分析维生素B₂及其荧光性光解产物的方法,即使用C18毛细管色谱柱,0.1%三氟乙酸的乙腈-水进行梯度洗脱,在激发波长为488 nm,发射波长为520 nm时,维生素B₂及近10种光降解产物得到了良好的分离。还研究了维生素B₂的光解反应速率与离子强度之间的关系,通过动力学计算得到维生素B₂在水溶液和PBS缓冲液中的光解反应速率常数k,并证明了k与离子强度呈正相关性。第三章是基于第二章的研究结果,对维生素B₂的光降解产物及维生素B₂的光降解机理进行探究。通过UPLC-MS-MS的数据,根据一级质谱、二级质谱得到的分子离子峰和碎片离子峰来进行分析,证明了光黄素和光色素这三种物质的存在;并根据质谱裂解规律解析了7种可能的维生素B₂光降解中间产物以及维生素B₂的光降解反应通路。第四章的主要目标是利用pCEC-LIF测定微囊藻毒素,首先设计了三种不同的荧光修饰方法:异硫氰酸荧光素直接修饰微囊藻毒素;基于“巯基-烯”点击化学的两步荧光修饰法及基于“巯基-烯”点击化学的一步荧光修饰法。反应条件经筛选和优化后,成功得到了目标化合物MC-CYS-FITC并经UPLC-MS-MS辅助确认了结构。同时建立了pCEC-LIF分离分析微囊藻毒素的方法:半胱氨酸修饰、异硫氰酸荧光素（FITC）衍生后,使用C18毛细管色谱柱,流动相为pH 9.1硼砂缓冲液和乙腈,梯度洗脱,激发波长488 nm,发射波长520 nm。在最佳色谱条件下,MC-RR和MC-LR达到基线分离,检出限分别为1.3×10^-12 mol/L和1.2×10^-12 mol/L。第五章对维生素B₂及微囊藻毒素的实验结果进行了总结,并对两者的分析手段、联用方式等实验内容进行了展望。