寨卡病毒（ZIKV）属于黄病毒科黄病毒属。寨卡病毒的传播主要是通过蚊子传播的,埃及伊蚊（A.aegypti）是寨卡病毒的关键载体。近年来,在美洲流行的寨卡病毒感染,对人类尤其是免疫低下的人群有较强感染性,可造成包括格林-巴利综合征,小头畸形和其他胎儿发育缺陷。全球寨卡疾病负担增加,但市场上暂时还没有针对该病毒传播的预防和治疗措施,亦没有成功研发出针对寨卡病毒的商用疫苗。埃及伊蚊唾液蛋白AgBR1（A.aegypti bacteria-responsive protein 1）,作为一种针对唾液蛋白抗体的小鼠抗原蛋白。目前已有研究表明,此蛋白可以抑制被寨卡病毒感染的蚊子叮咬的小鼠皮肤的早期炎症反应。本研究中,为了确定AgBR1是否可以抑制小鼠中由蚊子传播的ZIKV感染,而被用来研发疫苗,采用AgBR1进行主动免疫辅以经许可可用于人类疫苗研发的明矾水凝胶作为佐剂观察其对小鼠ZIKV感染的效果,结果表明,可提高易感染ZIKV的AG129小鼠模型的死亡率,延缓体重减轻和减轻病毒载量。为了确定AgBR1中哪一部分在免疫中起到了关键作用。本研究基于AgBR1蛋白全长设计将其分为4个截短体（AgBR1-S1,AgBR1-S2,AgBR1-S3,AgBR1-S4）,将其并成功表达。并通过制备抗AgBR1蛋白单克隆抗体,检测单克隆抗体分别与AgBR1-S1/S2/S3/S4此四个截短体蛋白的相互免疫作用。该部分研究确定了14号单克隆株单抗可与AgBR1-S2截短体蛋白分子反应。埃及伊蚊唾液蛋白NeSt1（Neutrophil stimulating factor 1）,也可以作为一种针对唾液蛋白抗体的小鼠抗原蛋白。已有研究表明,NeSt1蛋白可以刺激蚊子叮咬部位的嗜中性粒细胞以改变免疫微环境,从而允许更高水平的早期病毒复制并增强ZIKV发病机理。我们采用将AgBR1和NeSt1两种特异性的血清抗体结合进行被动免疫小鼠,观察其对AG129小鼠ZIKV感染的作用。结果表明,AgBR1和NeSt1两种特异性的血清抗体结合进行被动免疫小鼠可显著提高小鼠存活率并减少小鼠血液中的病毒载量,从而保护小鼠免受蚊子传播的ZIKV感染。这一发现表明,以AgBR1和NeSt1作为模型抗原的蚊子唾液蛋白的组合作为靶向,可以用作疫苗策略,以帮助预防蚊子传播的ZIKV感染。总体而言,本课题研究的这种针对蚊子唾液腺蛋白研制疫苗方法的好处建立在开发基于抗原载体的疫苗的可能性之上,这些疫苗存在可以有效抵抗同一载体携带的多种病毒的潜力。此外,该策略也可以与基于病毒抗原的疫苗接种策略相结合,从而提高其功效。随着ZIKV全球疾病负担的持续增加,针对蚊唾液腺蛋白的疫苗设计新策略可能是对应ZIKV感染传播的有用方法。这种方法的成功将指导基于抗ZIKV的抗原性蚊子蛋白的下一代疫苗的开发。