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人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus HIV)是引起人获得性免疫缺陷综合症(acquired immune deficiency syndrome AIDS)的主要病原体。世界卫生组织在2008年的报告之中,2007年,全世界HIV感染患者已经从2001年的3000万增长到3300万人,每年死于艾滋病的人数也从2001年的170万增加到200万。乙型肝炎病毒(hepatitis virus B, HBV)是嗜肝病毒科的原型病毒,该科病毒是肝细胞嗜性,而且都是DNA病毒。保守的评估认为,超过20亿的人口感染过HBV病毒,目前有超过3.5亿的人是HBV的携带者。由于HBV和HIV的全世界大范围的传播,以及两种病毒拥有共同的感染途径HBV和HIV共感染的现象在全世界范围内都比较普遍。HBx蛋白是HBV的非结构蛋白,也是由HBV最小的一个阅读框编码的。大量的研究表明HBx是多功能的蛋白,HBx蛋白不仅在HBV复制过程中非常重要,而且还可以与细胞内多种重要蛋白相互作用,影响多条信号通路及细胞周期的调节,甚至与肝癌的发生具有重要的关系。而且HBx还是HBV编码蛋白中唯一激活HIV转录的蛋白。尽管此前几个研究组研究了HBx激活HIV转录的机制,但目前仍不是很清楚。本论文就围绕这一机制进行了更加深入的研究。首先我们利用HBV的侵染性克隆以及其HBx缺失型突变体与HIV的单次复制克隆一起共转染细胞,证实了HBx蛋白在HBV复制上调HIV转录的过程中起到关键的作用。通过对HIV LTR进行点突变,我们再次证实NF-κB通路在HBx上调LTR转录的过程中是非必需的。在此基础上,我们通过竞争性抑制试验发现CREB和C/EBP通路可能参与到HBx对LTR的上调事件中。通过过表达CREB1/2和C/EBPβ,我们发现CREB1/2和C/EBPβ蛋白可以增强HBx对LTR的上调效应。实验中我们还通过染色质免疫沉淀的方法证实了HBx可以增加CREB2和C/EBPβ在LTR-129—80区的结合。通过点突变实验,我们进一步证实了位于该区域的CRE和C/EBP位点在HBx上调LTR转录的过程中起到重要作用。CBP (CREB结合蛋白)是个分子量很大的共激活子蛋白,可以乙酰化很多转录因子和组蛋白,并能与一些通用转录因子结合,对多种转录因子介导的转录有激活作用。而且有文章报道CBP可与HBx相互作用,并增加HBx对CREB结合位点介导的转录的激活作用。在此,我们也研究了CBP在HBx上调LTR过程中的作用。研究发现CBP可以与HBx协同上调HIV的转录,并能在HBx存在的条件下与LTR结合。另外我们还发现CBP的乙酰转移酶活性在此事件中并非必需,但是当过量CREB和C/EBP蛋白存在时,乙酰转移酶活性就显得重要。本研究为进一步理解HBx上调LTR转录提供了实验证据,为阐明HBV促进HIV复制和AIDS病程,以及如何治疗HBV和HIV共感染提供了理论基础。