小米多酚类活性物质的提取及抗氧化性研究

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本课题以小米为原料,分别采用常规溶剂法、微波辅助法及超声波辅助法提取其中酚类活性物质,并对其采用大孔吸附树脂纯化后,研究小米中酚类物质的体外抗氧化特性及其在食品工业中的应用。得出结论如下:1、为了确定小米粉中多酚类物质提取的最佳工艺条件,本实验通过单因素实验及响应面分析法,确定了采用常规溶剂法对提取小米多酚类活性物质影响显著的四个因素(乙醇体积分数、萃取温度、萃取时间及料液比),建立了该指标与四个因素间的数学模型,并得出采用常规溶剂法提取小米多酚类活性物质最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数70%,萃取温度40℃,萃取时间1h,料液比1:13,在此工艺条件下得到小米多酚提取得率为73.202mg/100g。采用微波辅助法提取小米多酚类活性物质最佳提取工艺参数为乙醇体积分数66%,微波时间120s,微波功率414W,料液比1:12,在此工艺条件下得到小米多酚提取得率为105.38mg/100g。采用超声波辅助法提取小米多酚类活性物质最佳提取工艺参数为乙醇体积分数70%,超声时间40min,超声温度40℃,料液比1:14,在此工艺条件下得到小米多酚提取得率为75.765mg/100g。2、选取4种大孔吸附树脂,采用静态吸附、解吸实验比较其对小米多酚的吸附分离效果,筛选出吸附分离效果较优的树脂,并对其动态吸附性能进行考察,结果表明:AB-8型树脂对小米多酚有较好的吸附和解吸效果,其最佳工艺条件为,吸附过程:上柱速率2mL·min-1、上样液pH为4左右、上样液浓度在0.12-0.14mg/mL范围内;洗脱过程:采用体积分数为70%的乙醇溶液以1mL·min-1洗脱速率进行洗脱。3、采用体外抗氧化实验,对纯化前后的小米多酚类活性物质对DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基的清除力进行了研究,并测定了其相对Vc还原力的大小。结果表明:在实验浓度范围内,JC对DPPH自由基、ABTS+自由基和超氧阴离子自由基的清除清除率分别高达73.09%(5mg·ml-1)、99.31%(3mg·ml-1)、93.57%(5mg·ml-1),说明小米多酚提取物具有的良好的抗氧化活性;且具有一定的还原性;但和Vc及常见合成抗氧化剂相比还有一定差距。采用Schaal烘箱法和Rancimat法测定了纯化前后小米多酚提取物对猪油的抗氧化性,并与现已广泛应用的BHT、BHA和TBHQ作对照。结果表明,小米多酚提取物能部分抑制猪油的氧化,但是与TBHQ、BHT、BHA相比有一定的差距;并且不同的小米品种其抗氧化性略有差别。4、通过利用紫外和红外光谱法对小米提取物进行扫描,可初步确认提取物的化学组成为多酚类物质,且pH值、提取溶剂及提取方法(微波辅助提取、超声辅助提取)对其结构无明显破坏作用。采用反相高效液相色谱柱分离,利用紫外可见光扫描光谱、红外可见光扫描光谱、质谱分析等方法鉴定为采用本实验提取方法得到分子量为300-500的多酚类化合物。
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