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人促卵泡激素(human follicle stimulating hormone,hFSH)是垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白类促性腺激素。在不孕不育的诊断和治疗中,FSH是发挥着重要作用的有生物活性的分子,在促使卵泡正常生长、成熟和性腺甾体类固醇的产生中不可缺少。对于女性,FSH的浓度对卵泡发育的启动和周期,及随后使卵泡达到成熟的时间和卵泡数目均至关重要。对男性来说,能与LH控制的睾丸素结合激活并保持正常精子的数目和质量。应用重组DNA技术生产的重组人FSH (rhFSH)具有标准化的分子量和生物学活性,避免了以前用于治疗的FSH由尿源提取在糖基结构上的差异,从而造成的FSH异构体生物活性上的差异。rhFSH还有优良的安全特性,这一点与尿源性的FSH相似,但却避免了尿源FSH给药时报道中一些病人可能出现的抗免疫反应。重组人促卵泡激素(rhFSH)为rhFSH基因转染到dhf-缺陷型的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)后,经过细胞培养,分离和高度纯化后得到。本文就重组人促卵泡激素(rhFSH)的理化性质和生物学活性进行了较为全面系统的研究。SDS-PAGE及MALDI-TOF-MS测定分子量,Edman降解法分别测定两个亚基的N末端15个氨基酸残基的序列,同时结合供试品的紫外光谱图,等电点及免疫印迹对蛋白,肽图进行定性分析,从而达到对重组人促卵泡激素(rhFSH)的结构确证及定性分析的目的。纯度用HPLC和非还原SDS-PAGE两种方法测定,其纯度达到95%以上;利用SDS-PAGE(银染)检测聚合体,样品中没有发现聚合体;蛋白浓度用Lowry法和SEC-HPLC,结果能够较好的吻合;RP-HPLC测氧化亚基的含量,氧化亚基小于5%;在唾液酸的含量检测方面我们采取了药典酸水解UV法及RP-HPLC;参考药典测了外源性DNA的残留量,CHO细胞蛋白残留及鼠IgG残留,符合规定。采用Wister大鼠测量体内生物活性,我们对多批样品进行测定,rhFSH的生物比活在12453IU/mg,12855U/mg,13403IU/mg,比文献报道7700-11300IU/mg高。同时我们考察了不同pH值、温度对rhFSH活性的影响,发现在pH7.0,-20℃时最稳定。