缺血再灌注期间大鼠心肌细胞和成纤维细胞单羧酸转运蛋白(MCT1)表达水平的研究

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目的以缺氧/复氧模拟心肌细胞和成纤维细胞的缺血/再灌注损伤模型,探讨缺血/再灌注期间大鼠心肌细胞及成纤维细胞MCT1表达的变化及其与缺血/再灌注损伤之间的关系。方法采用胰蛋白酶消化法和差速贴壁法体外培养和纯化Wistar大鼠心肌细胞和成纤维细胞,以缺氧3h /复氧60min模拟缺血/再灌注损伤,以缺氧前为正常对照。在缺氧前、缺氧3h、复氧30min、复氧60min四个时点检测培养上清内乳酸浓度;并以RT-PCR与Western blot检测细胞内MCT1mRNA和蛋白水平。结果1. MCT1在心肌细胞和成纤维细胞中皆有表达,正常的心肌细胞MCT1mRNA和蛋白表达水平均高于成纤维细胞(P<0.01);2.心肌细胞中MCT1在缺氧3h后表达下降(P<0.01),复氧30min后上升(P<0.01),复氧60min后恢复到缺氧前水平;3.成纤维细胞中MCT1在缺氧后和复氧后均表达上升(P<0.01);4.心肌细胞和成纤维细胞的胞外乳酸浓度在缺氧/复氧期间均低于缺氧前(P<0.01)。结论1. MCT1在大鼠心脏的心肌细胞和成纤维细胞皆有表达;正常心肌细胞MCT1表达高于成纤维细胞;心肌细胞再灌注30min后MCT1表达上升;成纤维细胞缺血3h后MCT1表达上升。2.心肌细胞和成纤维细胞胞外乳酸浓度与细胞MCT1的表达有相关变化趋势;3.心肌缺血再灌注损伤可能与心肌细胞成纤维细胞间的乳酸转运失调有关。
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