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红景天甙是红景天属植物的主要药效成分,是一种很有前途的环境适应药物,具有抗疲劳、抗衰老、抗微波辐射、抗病毒及抗肿瘤等特异功效,尤其在军事、航天、运动及保健医学上具重要应用价值。由于对其药用价值的开发致使野生红景天植物资源濒临灭绝。本研究以解决红景天的资源紧缺问题为出发点,以大花红景天为实验材料,试图通过植物组织培养技术和细胞培养技术建立大花红景天细胞悬浮培养体系。并以大花红景天悬浮细胞颗粒为实验材料,对与红景天甙代谢可能相关的生理生化指标进行测定并利用高效液相色谱仪对悬浮细胞系中的红景天甙和酪醇进行分离提取。具体结论如下:以大花红景天种子作为外植体,采用70%乙醇结合9%NaClO的方法灭菌,建立了无菌培养体系。大花红景天植株的不同部位中,植株的幼叶或叶柄比较容易诱导愈伤组织,诱导叶片愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+6-BA0.5 mg/L+NAA3.0mg/L。接下来将获得的稳定的愈伤组织转移至添加TDZ0.5mg/L和NAA0.5mg/L的MS液体培养基中,构建了稳定的大花红景天悬浮细胞颗粒状细胞培养体系。室温下,大花红景天悬浮细胞颗粒状细胞的生物量随着培养时间的延长呈S型曲线增长方式扩增。大花红景天悬浮细胞颗粒的PAL活性在培养周期内表现出先升后降的规律性变化。而β-D-葡萄糖苷酶的活性呈现出先升后降的规律性变化,并且活性最大值与PAL活性的最大值同步出现。葡萄糖的含量大致呈现上升—平稳—下降的趋势而多糖含量在生长周期的前期基本持平,而后有急剧上升再下降的现象。提取红景天甙和酪醇的最佳工艺为石油醚浸泡2次,每次时间为30min;75%甲醇超声提取一次,时间为30min。提取红景天甙和酪醇的量分别为29.037mg/g和15.633mg/g。