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猪遗传物质与人有很高的同源性,其组织器官形态大小、生理生化代谢也与人很接近,是进行人类异种器官移植研究的理想动物,而研究异种器官移植需对早期胚胎进行遗传操作。目前,猪胚胎体外生产效率不高,而且猪胚胎移植主要采用手术法,过程繁琐,对受体伤害很大,因而急需探索新的方法。本研究旨在优化猪卵母细胞体外培养、体外受精体系以及建立成熟的猪胚胎非手术法移植方法,为猪品种改良及异种器官移植研究提供技术支撑。 本研究用刺破法、切剖法和抽吸法对卵巢表面3～6mm 卵泡卵母细胞进行回收,观察它们是否对卵母细胞回收率、体外成熟和体外受精产生影响;将卵母细胞用套皿培养法和常规培养法进行培养,探讨套皿培养法对卵母细胞体外成熟及发育能力可能存在的影响;用手术法从子宫获取桑椹胚和囊胚,经非手术法将这些胚胎移入同期受体,检测怀孕率及着床胎儿数。通过以上试验,获得如下结果: 1.刺破法和切剖法A、B 级卵母细胞回收率差异不显著(55.3% vs 50.0%;13.8% vs 16.1%),但均显著高于抽吸法(P < 0.05); 刺破法的C 级卵母细胞回收率极显著低于切剖法和抽吸法(5.9% vs 15.2%, 15.9%, P < 0.01),切剖法和抽吸法差异不显著;切剖法的卵母细胞总回收率与刺破法差异不显著,但两者均高于抽吸法(81.3%, 75.0% vs 53.4%; P < 0.05)。2.A、B 级卵母细胞核成熟率以刺破法最高,但与其它两种方法相比差异不显著,三种回收方法获取的A 级卵母细胞核成熟率均显著高于B 级卵母细胞(P < 0.05)。3.回收方法能够影响体外受精结果,刺破法卵裂率(33.1%)虽与切剖法(22.2%)差异不显著,但显著高于抽吸法(21.0%)。4.套皿组卵母细胞核成熟率、穿卵率、单精入卵率、每个卵母细胞所含精子数(S/O)以及卵裂率与单皿组差异不显著,但雄原核形成率和囊胚形成率显著高于单皿组(P < 0.05)。5.将小鼠2～4 细胞胚胎采用非手术法移入4 头受体,其中3 头可用手术法回收到