【摘 要】
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目的:本研究旨在构建IER3基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,从人肺癌A549细胞系中扩增出该基因,并克隆至pGEMTeasy载体中,测序正确后,亚克隆至pcDNA3.1-6His载体。将构建
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目的:本研究旨在构建IER3基因真核表达载体。方法:采用PCR方法,从人肺癌A549细胞系中扩增出该基因,并克隆至pGEMTeasy载体中,测序正确后,亚克隆至pcDNA3.1-6His载体。将构建成功的pcDNA3.1-6His-IER3质粒利用脂质体介导转染入A549细胞,采用Western blot和荧光显微镜观察目的蛋白的表达。结果:IER3基因正确连接到了 pcDNA3.1-6His中,并定位于A549的细胞质内,蛋白质组印迹(Westernblot)结果显示A549细胞能够正确表达IER3蛋白。结论:成功构建了 IER3基因真核表达载体,为进一步研究IER3基因在肿瘤发生、发展中的作用提供了基础。
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