乙肝病毒X蛋白对肝细胞β-catenin的影响及其作用机制的研究

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乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)编码的X蛋白在HBV致癌过程中发挥着关键性的作用。HBX作为反式作用因子,不能直接和双链DNA结合,而是通过蛋白与蛋白间的相互作用行使功能,可以调节转录、引起DAN修复蛋白质失活以及激活信号转导通路。Wnt信号传导途径在胚胎发育和肿瘤发生过程中起着十分重要的作用,而β-连环蛋白(β-catenin)是这个信号传导途径中的一个重要成员。HBX和β-catenin关系的研究对HBV导致肝癌的发生机制、肝癌的预防和治疗都有重要意义,为阐明Wnt信号转导途径中β-catenin在肝癌发生和发展中的作用提供理论依据。本课题采用带有GFP的腺病毒高表达载体系统有效转染人正常肝细胞系L02,并用Western blot证实HBX是否能有效在L02细胞中表达。用RT-PCR、免疫细胞化学方法分析HBx对正常细胞中β-catenin定位及基因表达的变化,并通过免疫共沉淀的方法来分析HBX与β-catenin、HBX与APC蛋白之间是否存在直接相互作用,了解HBX对正常肝细胞中β-catenin的影响及作用机制,为进一步研究HBX导致肝癌的机制及其预防治疗奠定基础。
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