miR-155-5P在脓毒症急性肺损伤时调控肺泡巨噬细胞IL-6、MIP-2的表达对中性粒细胞迁移的影响

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目的:探讨脓毒症急性肺损伤(ALI)时miR-155-5P对肺泡巨噬细胞白介素-6(IL-6)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的调控作用及中性粒细胞迁移的影响。方法:培养小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)并将其分为对照组、脓毒症组和miR-155-5P抑制物组,miR-155-5P抑制物组预先通过miR-155-5P antagomir完成转染,采用脂多糖干预脓毒症组和miR-155-5P抑制物组12 h,应用RT-PCR检测3组MH-S细胞miR-155-5P、白介素6 mRNA和MIP-2 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测细胞悬液中白介素6和MIP-2的浓度;再次将MH-S分为上述3组培养在Transwell板的下室,CFSE荧光染料标记的中性粒细胞培养在上室,脂多糖干预后应用流式细胞术分别检测上室与下室细胞的荧光值,计算中性粒细胞的迁移率。结果:与对照组相比,脓毒症组肺泡巨噬细胞的miR-155-5P表达明显上调(P<0.05),IL-6mRNA和MIP-2mRNA的表达也明显上调(P<0.05),同时IL-6、MIP-2的浓度和中性粒细胞迁移率均显著增加(P<0.05);而miR-155-5P抑制物组细胞的miR-155-5P表达被抑制(P<0.05),IL-6mRNA、MIP-2mRNA的表达及IL-6、MIP-2的浓度均低于脓毒症组(P<0.05),高于对照组(P<0.05),中性粒细胞迁移率明显低于脓毒症组(P<0.05),高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.528)。结论:脓毒症ALI时,肺泡巨噬细胞miR-155-5P基因高度表达,促炎因子IL-6mRNA、MIP-2mRNA的表达也明显上调,其促进IL-6、MIP-2的产生,使中性粒细胞大量趋化迁移至肺内,造成肺损伤;而抑制miR-155-5P的表达,可以抑制IL-6、MIP-2的产生,从而减少中性粒细胞的趋化迁移,起到肺保护作用。
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