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急性肺损伤(acute lung injury，ALI)是由于致病因子激活中性粒细胞、肺巨噬细胞等炎症效应细胞，引发多种细胞因子和炎症介质的失控性释放，从而引发肺脏的过度炎症反应，常可并发多器官功能障碍（multiple organ dysfunction syndrome，MODS），病死率高。目前对其发病机理仍未完全阐明。近年来研究发现，核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)居于许多细胞信号转导通路的交汇处，其诱导性活化可影响许多前炎症介质如TNFα、IL-1 β、IL-6及IL-8等释放，以及诱生性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthases，iNOs）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）等合成和分泌。 IκBα磷酸化、泛素化降解是NF-κB活化的重要步骤，而蛋白磷酸化-去磷酸化是细胞信号转导调节的基本机制。本课题在既往研究的基础上，通过调节猪肺泡巨噬细胞（swine alveolar macrophage，s-AM）内蛋白磷酸化-去磷酸化动态平衡，干预NF-κB活化，试图抑制炎症介质的释放，阻断炎症介质“瀑布效应”形成，为ALI的治疗提供新的理论依据。本研究课题应用荧光检测术、Western Blot、EMSA、RT-PCR和ELISA等实验技术，观察内毒素脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，猪肺泡巨噬细胞内蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）、蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatase，PTP）、IκBα、NF-κB、COX-2-mRNA和细胞培养上清中前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）水平的变化，以及单独或联合应用阿斯匹林、PTP抑制剂－过氧钒酸钠（peroxovanadium，POV）、蛋白激酶C抑制剂－Calphostin C干预处理30min后上述检测指标的变化。研究结果显示：(1) LPS刺激后，猪肺泡巨噬细胞内PKC活性、胞核提取物NF-κB、COX-2 mRNA和细胞培养上清PGE2水平呈一过性升高，胞浆PTP活性和IκBα水平则表现为一过性降低，且PKC、PTP活性变化最先出现；(2) 非甾体类抗炎药物阿斯匹林在抑制LPS刺激诱导的s-AM PKC活性、NF-κB活化、COX-2 mRNA表达和PGE2合成与释放的同时，可抑制LPS刺激诱导的IκBα降解和PTP活性的下调；(3) 联合抑制试验，PKC非特异性抑制剂Calphostin C可增强阿斯匹林对LPS刺激诱导的s-AM炎症介质的合成和释放，而PTP抑制剂过氧钒酸钠则表现相反的作用。研究结果表明：LPS刺激猪肺泡巨噬细胞产生炎症介质的病理生理过程中，蛋白<WP=9>激酶活性增强和磷酸酶活性降低，引起蛋白激酶-磷酸酶系统失去平衡，导致IκBα的酸化和泛素化降解增强，从而启动和增强NF-κB信号的转导，前炎症介质（如COX-2）基因转录和表达增强，引起炎症介质过度释放。上述研究证实，阿斯匹林可抑制PKC活性，联合应用阿斯匹林和蛋白激酶抑制剂可有效降低肺泡巨噬细胞LPS刺激后过度释放炎症介质。上述研究结果似为临床治疗急性肺损伤提供了新的思路。