目的:建立优化的用于胰液差异蛋白质组学研究的双向电泳方法;应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌与慢性胰腺炎、胆总管结石患者胰液间的差异蛋白质表达,筛选胰腺癌胰液中可能的肿瘤标记物。方法:比较多种改进后因素对双向电泳图谱质量的影响。应用优化的双向电泳及图像分析方法选取胰腺癌患者胰液中差异表达蛋白质点,经质谱分析给予鉴定。结果:获得了分辨率高的胰液双向电泳图谱;鉴定出在胰腺癌患者胰液中特差异表达的8个蛋白质点。TTR二聚体支链A、丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)前蛋白原和胰脂酶相关蛋白1(PLRP1)在胰腺癌患者胰液中表达明显增高,达2倍以上(P﹤0.01);载脂蛋白A-1(Apo A-1)支链A、胰石蛋白、Reg1β再生蛋白前体、弹性蛋白酶3B前蛋白原和糜蛋白酶原B前体则相反,表达呈2倍以上降低。结论:优化的方法可以获得重复性好、分辨率高的双向电泳图谱。人胰腺癌与慢性胰腺炎、胆总管结石患者胰液的蛋白质谱存在一定的差异,并鉴定出一些胰腺癌相关的差异表达蛋白质。