重组毕赤酵母高效表达细菌亮氨酸氨肽酶及发酵优化

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亮氨酸氨肽酶(LAP;EC 3.4.11.1)是一种重要的风味蛋白酶,可解离多肽链N末端的一些疏水性氨基酸而常被用于蛋白水解液的脱苦;还可用于生物活性肽的制备以及蛋白序列的测定分析。本论文将来源于枯草芽孢杆菌Zj016的氨肽酶基因克隆转化到毕赤酵母GS115的染色体上,成功实现了胞外分泌表达。然后对该重组氨肽酶进行发酵条件优化、分离纯化、酶学性质表征、N糖基化分析及重组氨肽酶应用的初步探究。对重组菌的摇瓶发酵进行优化,得到最佳发酵条件为:诱导起始时间为20 h,诱导甲醇浓度10 g·L-1,装液量2
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