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肿瘤多药耐药(multiple drug resistance，MDR)是肿瘤临床治疗过程中的最大难题。产生MDR的原因之一是细胞膜上的蛋白转运体mdr1/P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在耐药细胞中过度表达，它可以把抗肿瘤药物“泵”到细胞外，使肿瘤细胞内化疗药物保持在较低浓度，而达到耐药。抗菌肽的作用靶点是肿瘤细胞的细胞膜上的磷脂及膜结构，不易产生耐药性，因此有望发展成为新型的抗肿瘤药物。抗菌肽Temporin-1CEa是从中国林蛙皮肤分泌物中分离纯化的天然抗菌肽，具有较好的抗癌活性。本论文主要探讨了抗菌肽Temporin-1CEa对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADR的作用。我们首先通过MTT比色法，检测了抗菌肽Temporin-1CEa对MCF-7和MCF7/ADR的生长抑制作用；利用乳酸脱氢酶（LDH）法和AnnexinV-FITC单染法研究了Temporin-1CEa对两种癌细胞的选择性；并通过激光共聚焦扫描显微镜观察罗丹明（Rhodamine，Rho）标记的Temporin-1CEa在细胞中的作用部位；最后通过测定MCF-7和MCF7/ADR的细胞膜表面的PS含量、细胞表面净电荷的测量以及检测MCF7/ADR中P-gp的含量等实验，来探讨抗菌肽Temporin-1CEa对耐药细胞生长的影响。MTT结果显示，抗菌肽Temporin-1CEa对MCF-7和MCF7/ADR有不同程度的生长抑制作用，且对MCF7/ADR更敏感；LDH结果显示，Temporin-1CEa对两种癌细胞具有选择性，对正常乳腺细胞和皮肤细胞未见明显的细胞毒性。激光共聚焦扫描显微镜结果显示，Temporin-1CEa与P-gp共同定位在MCF7/ADR的细胞膜上，从而发挥作用。流式细胞仪结果显示，MCF7/ADR的细胞膜表面的负电荷比MCF-7的明显增加，使得阳离子抗菌肽Temporin-1CEa更易于通过静电作用与耐药细胞结合；抗菌肽Temporin-1CEa处理MCF7/ADR细胞1h后，MCF7/ADR中与抗体结合的P-gp量减少，P-gp抑制剂维拉帕米可以降低抗菌肽Temporin-1CEa对MCF7/ADR的作用。PCR实验结果说明，抗菌肽Temporin-1CEa使MCF7/ADR中的P-gp的表达量减少了；对盐酸阿霉素的逆转实验结果说明，抗菌肽Temporin-1CEa能逆转MCF7/ADR对盐酸阿霉素的耐性，增加了MCF7/ADR对抗肿瘤药盐酸阿霉素的敏感性。