论文部分内容阅读
目的:探讨岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:在体外培养人肺腺癌A549细胞株至对数生长期,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测单用岩黄连总碱在不同浓度(0.1g/L、0.05g/L、0.01g/L、0.005g/L)分别作用24h、48h、72h后,对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况,用MTT法检测阴性对照、单用岩黄连总碱0.03g/L、顺铂0.002g/L以及岩黄连总碱联用顺铂作用48h后,对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况。Hoechst染色观察阴性对照、单用岩黄连总碱0.03g/L、顺铂0.002g/L以及岩黄连联用顺铂作用48h后,对人肺腺癌A549细胞的生长抑制情况。RT-PCR法检测阴性对照、岩黄连0.03g/L、顺铂0.002g/L以及岩黄连总碱和顺铂联合用药作用于人肺腺癌A549细胞48h后,对人肺腺癌A549细胞中caspase-3、survivin mRNA的表达影响变化情况。Western-blot法检测阴性对照、岩黄连总碱0.03g/L、顺铂0.002g/L及岩黄连联总碱用顺铂作用于人肺腺癌A549细胞48h后,对人肺腺癌A549细胞中caspase-3、survivin蛋白的表达变化情况。结果:MTT结果提示岩黄连总碱对人肺腺癌A549细胞增殖具有一定的抑制作用,且抑制作用呈现时间剂量关系(P<0.05)。岩黄连总碱和顺铂联合用药组作用与人肺腺癌A549细胞48h后较单用药组的细胞增殖抑制作用明显(P<0.05)。形态学观察结果显示联合用药组人肺腺癌A549细胞凋亡细胞数目明显多于单药组。RT-PCR结果提示岩黄连总碱与顺铂联合用药组较单用药组上调了caspase-3mRNA的表达,下调了survivin mRNA的表达(P<0.05)。Western-blot结果显示岩黄连总碱与顺铂联合用药组较单用药组caspase-3蛋白表达增加,survivin蛋白表达减少(P<0.05)。结论:本研究在体外证明了岩黄连总碱具有一定的抑制人肺腺癌A549细胞增殖作用,且岩黄连总碱与顺铂联用可以增强其对人肺腺癌A549细胞的抑制作用,诱导肺癌细胞凋亡,其机制可能与上调caspase-3的表达和下调survivin的表达有关。本研究为临床肺癌的治疗探索了一条新的治疗思路及药物选择的组合,为进一步研究打下了基础。