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第一部分CD97、CD55在胃癌细胞株中的表达及其和胃癌细胞迁移、侵袭能力的关系目的:系统地检测CD97和CD55基因和蛋白在胃癌细胞株中的表达水平及各胃癌细胞株的迁移和侵袭能力,探寻CD97和CD55基因和蛋白表达水平和胃癌细胞株的迁移、侵袭能力之间的关系。方法:采用23131、AGS、BGC823、KATO-Ⅲ、MGC803和SGC7901 6种胃癌细胞株。RT-PCR检测CD97mRNA不同异构体和cd55mRNA的表达,免疫荧光流式细胞技术检测CD97EGF和CD97stalk和cd55蛋白的表达,用细胞迁移和侵袭试验研究各胃癌细胞株的迁移和侵袭能力。结果:CD97EGF三种异构体mRNA、CD97TM7mRNA以及CD55mRNA在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,但相互之间在各细胞株中的表达强弱没有相关性(P>0.05)。CD97EGF和stalk抗原和CD55抗原在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,CD97EGF抗原和stalk抗原的表达强度有相关性(r=1.000,P<0.001),CD97EGF、stalk抗原和CD55抗原之间在表达强度上均没有相关性(P>0.05)。MGC803细胞的迁移和侵袭细胞数最多,KATO-Ⅲ细胞的迁移和侵袭细胞数最少,各胃癌细胞株的迁移和转移细胞数存在着一定的相关性(r=0.943,P=0.005)。CD97EGF抗原、stalk抗原的表达强度和细胞的迁移和侵袭能力有着很强的相关性(P<0.05),CD55抗原在表达比例和强度上和细胞的迁移和侵袭能力均没有相关性。结论:CD97和CD55基因和蛋白在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,CD97EGF抗原、stalk抗原的表达强度和细胞的迁移和侵袭能力有着很强的相关性。第二部分siRHA干扰CD97的表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响目的:设计合成有效的siRNA-CD97,体外转染胃癌细胞株,观察CD97表达改变及其和胃癌细胞株迁移、侵袭能力改变的关系,进一步明确CD97在胃癌细胞生长、分化、迁移和侵袭能力上的作用。方法:采用AGS利MGC803种胃癌细胞株。针对CD97基因设计siRNA,采用化学法合成,筛选出最有效的CD97-siRNA。CD97-siRNA转染胃癌细胞后48小时用Real time PCR检测CD97mRNA表达的改变,72小时用免疫荧光流式细胞技术检测CD97蛋白表达的改变,MTT法检测细胞增殖能力的改变,并用细胞迁移和侵袭试验检测细胞株迁移和侵袭能力的变化。结果:在siRNA-CD97转染后48h,Real time PCR结果显示对于AGS和MGC803,CD97mRNA的表达量相对于未转染的细胞分别下降了(89.34±9.95)%和(95.42±1.93)%。转染后72h,流式细胞仪检测结果显示对于AGS,CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(19.29±3.45)%和(30.11±5.93)%,对于MGC803,CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(26.25±5.73)%和(16.22±3.23)%,MTT法检测结果显示,siRNA-CD97转染前后细胞吸光度值的差异没有显著性。迁移和侵袭实验结果显示对于AGS,siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(67.63±12.03)%和(68.02±15.63)%,对于MGC803,siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(14.92±2.03)%和(22.09±5.43)%。结论:siRNA-CD97转染能够抑制CD97基因和蛋白表达,随着CD97表达的降低,细胞迁移和转移的能力也明显减弱。