CD97、CD55在胃癌细胞株中的表达和siRNA对CD97基因的沉默效应

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:teachme
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分CD97、CD55在胃癌细胞株中的表达及其和胃癌细胞迁移、侵袭能力的关系目的:系统地检测CD97和CD55基因和蛋白在胃癌细胞株中的表达水平及各胃癌细胞株的迁移和侵袭能力,探寻CD97和CD55基因和蛋白表达水平和胃癌细胞株的迁移、侵袭能力之间的关系。方法:采用23131、AGS、BGC823、KATO-Ⅲ、MGC803和SGC7901 6种胃癌细胞株。RT-PCR检测CD97mRNA不同异构体和cd55mRNA的表达,免疫荧光流式细胞技术检测CD97EGF和CD97stalk和cd55蛋白的表达,用细胞迁移和侵袭试验研究各胃癌细胞株的迁移和侵袭能力。结果:CD97EGF三种异构体mRNA、CD97TM7mRNA以及CD55mRNA在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,但相互之间在各细胞株中的表达强弱没有相关性(P>0.05)。CD97EGF和stalk抗原和CD55抗原在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,CD97EGF抗原和stalk抗原的表达强度有相关性(r=1.000,P<0.001),CD97EGF、stalk抗原和CD55抗原之间在表达强度上均没有相关性(P>0.05)。MGC803细胞的迁移和侵袭细胞数最多,KATO-Ⅲ细胞的迁移和侵袭细胞数最少,各胃癌细胞株的迁移和转移细胞数存在着一定的相关性(r=0.943,P=0.005)。CD97EGF抗原、stalk抗原的表达强度和细胞的迁移和侵袭能力有着很强的相关性(P<0.05),CD55抗原在表达比例和强度上和细胞的迁移和侵袭能力均没有相关性。结论:CD97和CD55基因和蛋白在各胃癌细胞株中均有不同程度的表达,CD97EGF抗原、stalk抗原的表达强度和细胞的迁移和侵袭能力有着很强的相关性。第二部分siRHA干扰CD97的表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响目的:设计合成有效的siRNA-CD97,体外转染胃癌细胞株,观察CD97表达改变及其和胃癌细胞株迁移、侵袭能力改变的关系,进一步明确CD97在胃癌细胞生长、分化、迁移和侵袭能力上的作用。方法:采用AGS利MGC803种胃癌细胞株。针对CD97基因设计siRNA,采用化学法合成,筛选出最有效的CD97-siRNA。CD97-siRNA转染胃癌细胞后48小时用Real time PCR检测CD97mRNA表达的改变,72小时用免疫荧光流式细胞技术检测CD97蛋白表达的改变,MTT法检测细胞增殖能力的改变,并用细胞迁移和侵袭试验检测细胞株迁移和侵袭能力的变化。结果:在siRNA-CD97转染后48h,Real time PCR结果显示对于AGS和MGC803,CD97mRNA的表达量相对于未转染的细胞分别下降了(89.34±9.95)%和(95.42±1.93)%。转染后72h,流式细胞仪检测结果显示对于AGS,CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(19.29±3.45)%和(30.11±5.93)%,对于MGC803,CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(26.25±5.73)%和(16.22±3.23)%,MTT法检测结果显示,siRNA-CD97转染前后细胞吸光度值的差异没有显著性。迁移和侵袭实验结果显示对于AGS,siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(67.63±12.03)%和(68.02±15.63)%,对于MGC803,siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(14.92±2.03)%和(22.09±5.43)%。结论:siRNA-CD97转染能够抑制CD97基因和蛋白表达,随着CD97表达的降低,细胞迁移和转移的能力也明显减弱。
其他文献
<正> 联合国的研究机构及经济合作与发展组织正式提出“知识经济”的概念后,迅速得到不少国家著名学者的赞同,并在经济界和政治界达成共识:“当今世界已从工业经济时代向知识
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
[目的]结直肠癌发病率逐年升高,多数患者确诊时已属晚期,肝脏和淋巴结转移是影响患者预后的重要原因。寻找结直肠癌转移灶中稳定、过度、特异表达的靶基因,为化疗药物提供敏
【中图分类号】G623.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2017)24-0047-01  小学语文是一门最基本的学科,在我们的生活、工作和学习中占有举足轻重的地位,一堂课中如何有效地提高教学质量,培优学生的学习习惯是不容忽视的。它为我们以后的学习和深造奠定了良好的基础。语文教学并不是我们传统思想认为的“死记硬背”,也有较好的语文方法和途径,因此如何提高小学语文课堂教学效率,这
第一部分干扰CD44v3的表达对肺腺癌A549细胞侵袭行为的影响目的研究肺腺癌细胞A549的侵袭能力和粘附分子CD44v3表达的关系。方法用pRNAT-H1.1/Neo(6.1kb)质粒构建一个能够稳定
近年来行政事业单位成本管理问题越来越受重视,成本控制与管理已经成为事业单位开展各项目的一个必要工作内容。针对当前在成本管理中出现的问题,笔者将在本文中提出并给予策
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
目的:研究hIL-24基因重组的真核表达质粒pcDNA3.0-hIL-24在CHO细胞中的表达产物和原核表达质粒pET-21a(+)-hIL-24在大肠杆菌中高效表达的产物经部分纯化、复性后的rhIL-24蛋
大肠癌是常见的恶性肿瘤,占所有癌症的9%—15%。大肠癌的发病过程一般较长,从正常上皮、增生、腺瘤、原位癌到转移,有明显的阶段性。大肠癌发生发展的多基因参与、多步骤及多阶段
为了改善笔头球座体表面耐磨性能,延长圆珠笔的使用寿命,采用扫描电子显微镜、X射线光电子能谱仪对易切削不锈钢线材制成的笔头球座体表面润滑膜进行表征,并通过圆珠笔书写润