农杆菌介导虎杖芪合酶基因遗传转化枣树增强抗性的研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nzj66
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
壶瓶枣(Zizyphus jujuba Mill.)是中国优质枣品种之一,但真菌性病害已严重制约了壶瓶枣生产;白藜芦醇作为植物次生代谢产物不但能提高果树抗真菌能力,还具有具有众多的药理和保健功能,其中最令人瞩目和具有发展前景的是其抗肿瘤、心血管保护、抗氧化功能。大量研究表明,遗传转化STS基因能够增强植物的抗真菌能力,本研究的目的为芪合酶基因遗传转化枣树提高枣树的抗真菌病害能力和改善枣的果品品质。壶瓶枣作为山西太谷的地理标识品种,经济价值高,产业发展前景好。白藜芦醇在虎杖根中含量较高,前期研究从虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.)根中分离得到白藜芦醇合成芪合酶关键基因PcPKS5(EU647245),具有高效催化合成白藜芦醇功能。本研究通过组织培养与遗传转化技术,对壶瓶枣优良单株进行组织培养,即获得高效茎尖和茎段诱导的丛生芽建立植物再生体系,构建虎杖芪合酶基因植物表达载体,转化农杆菌,将虎杖白藜芦醇生物合成关键基因PcPKS5遗传转化壶瓶枣。结果如下:(1)优化壶瓶枣径段诱导得到高分化率的丛生芽遗传转化体系。将壶瓶枣再生体系材料剪成0.8-1.0 cm含茎尖和茎段的外植体,农杆菌侵染菌液中浸泡15.0min,集中置于培养基上共培养3天,避光培养,转入含Cb300 mg/L, AS 60 mg/L丛生芽诱导分化培养基中培养5-6周。将分化丛生芽转接至含4.0mg/L Basta,5-6周检测阳性植株,为壶瓶枣成功实现遗传转化奠定了基础;(2)成功将狗头枣叶片外植体材料诱导出愈伤组织,并分化得到完整植株,并建立了狗头枣叶片再生遗传转化体系;(3)壶瓶枣遗传转化材料经Basta筛选、GUS显色、gDNA PCR、RT-PCR等检测证实,成功获得到3个阳性转基因壶瓶枣株系,荧光实时定量检测RNA瞬时表达得到其中株系2表达效率高于其他两个株系。经植物化学成分鉴定遗传转化植株中存在白藜芦醇,研究结果表明转化植株中虎杖芪合酶在壶瓶枣异源表达,目的基因表达代谢生成目标产物白藜芦醇,其鲜重含量为0.45μg/g,抑菌效果相当于1ug/ul白藜芦醇样品(抑菌率平均为23.08%),具备抗真菌桃褐腐(Monilinia fructicola)真菌、枣假尾孢(Isariopsis imdica var. Ziziphi)、细交链孢菌[Alternaria alternate(Fr.)Keissler]的能力。同时相对野生型植株,朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)有趋避遗传转化植株的现象发生。本研究在壶瓶枣成功遗传转化虎杖芪合酶基因,获得壶瓶枣遗传转化新材料。且PcPKS5在枣树中异源表达,转基因材料中能够代谢合成白藜芦醇,提高转PcPKS5基因壶瓶枣抗枣树病原真菌病能力,研究结果为发掘枣树新的种质资源提供技术途径。有关壶瓶枣遗传转化材料是否在果实中积累,改善果品品质仍需深入研究。
其他文献
本体作为一种领域知识结构化描述和推理的基础已经获得广泛认可.然而,本体本身是异构的.特别在多Agent系统、语义网、知识管理等开放环境下,如何协调不同领域的本体,甚至是同领域
<正>汽车电子产业正经历一轮深刻变革,未来汽车将向安全、互联、智能、节能的方向发展,高级汽车驾驶辅助系统(ADAS)、无人驾驶、车联网(V2X)、新能源汽车等新产品和新功能层
14世纪,英国上议院利用与谘议会的密切联系取得了司法权。此后,上议院逐渐地扩展其权能范围,取得了包括初审管辖权和对下级法院审判案件的管辖权,中世纪后期,上议院的司法权
目的 探讨曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2(HER2)阳性晚期胃癌的疗效及对P53、表皮生长因子受体(EGFR)表达影响。方法 回顾性分析2017年1月至2018年12月青岛市中
【摘要】随着中国高铁建设的不断完善,改变了中国人民的出行效率,但是高速移动环境下的4G网络质量对用户感知有重要影响。在高铁场景下,用户的上网需求极大,下载速度对用户体验影响极大,因此找到高铁专网用户下载速度较低的原因并提出相应的解决对策,对运营商改善用户体验,提升品牌形象有着重要的意义。本文以中国移动某省公司的高铁环境为例,分析了几种情况对高铁专网用户下载速度的影响,有针对性地提出了几个解决方案,
中心线是图像几何形态的一种重要拓扑描述.文中提出一种从三维图像中获取树状物体的中心线方法.先利用横截面算法快速将初始中心线定位于目标附近,然后采用Snake模型和距离变换方法将初始中心线引导到准确位置,有效地解决了因Snake初始位置偏离目标太远而导致的收敛速度慢和部分点收敛于局部极值点的问题.
实时、准确的交通流量预测是智能交通系统发展的关键.AOSVR是一种支持向量机的在线更新算法,具有模型在线学习的特点,可应用于交通流量的实时预测,其中模型参数的选择是预测
为了降低跌倒对老年人造成的危害,本文设计了一种基于MEMS传感器的可穿戴式跌倒监测系统。采用MEMS传感器MPU6050与低功耗蓝牙芯片CC2541采集人体加速度与角速度信号;提出基
月季(Rosa chinensis Jacq.),是中国最主要的花卉之一,已在中国栽培了上千年,于1793年传入西欧。它是一种城市花卉,主要种植于北京等其他37个城市。同时,月季花种植受土壤盐
在图像辅助的惯性末制导系统中,提出了一种基于极线约束的图像目标识别可信度评价方法.当惯导系统给出的摄像机姿态或图像中目标的像素点位置存在误差时,为了平衡极线约束方程需要引入一个冗余量(residual),该冗余量可由惯导系统给出的摄像机两位置的相对运动及相应图像中目标点的像素位置计算得到.当惯导系统的姿态误差小于0.3°时,冗余量可以用来评价图像目标识别的可信度.理论推导及仿真实验证明,冗余量作为