【摘 要】
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目的:初步了解细胞因子TNFα和化疗药物吉西他滨作用于胰腺癌细胞株后的影响及相关机制。方法:用不同浓度梯度的TNFα和吉西他滨处理胰腺癌细胞株panc-1,CCK-8法检测细胞的活
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目的:初步了解细胞因子TNFα和化疗药物吉西他滨作用于胰腺癌细胞株后的影响及相关机制。方法:用不同浓度梯度的TNFα和吉西他滨处理胰腺癌细胞株panc-1,CCK-8法检测细胞的活性,显微成像观察细胞形态。选取三个时间段12h,24h和48h,用Elisa法检测上清中IL-1β和IL-18的释放量,WB法及qPCR法检测各时间段焦亡相关信号通路分子GSDMD,GSDME,Caspase-1/3/4/5的蛋白和mRNA相对表达量。结果:1.TNFα和吉西他滨作用于Panc-1细胞系后在显微镜下可以观察到细胞焦亡特征性的空泡现象。2.TNFα组和吉西他滨组上清中IL-1β和IL-18的释放量明显高于空白对照组(NC组)(P<0.05),差异有统计学意义。3.qPCR结果提示,TNFα刺激Panc-1细胞系,GSDME与Caspase-3的基因表达量与NC组相比没有明显的统计学差异(P>0.05),而GSDMD与Caspase-4的基因表达量与NC组相比有统计学差异(P<0.05),在24h与48h时,Caspase-1基因与NC组相比有统计学差异(P<0.05)。吉西他滨刺激Panc-1细胞系,Caspase-3与GSDME的基因表达与NC组相比有统计学差异(P<0.05)。在48h时,Caspase-1/4/5与GSDMD的基因表达与NC组相比有统计学差异(P<0.05)。4.WB结果显示,TNFα与吉西他滨刺激Panc-1细胞后,Caspase-3与GSDME的蛋白表达量与NC组相比有统计学差异(P<0.05),在TNFα组中,Caspase-1和Caspase-5蛋白的表达量与NC组相比有统计学差异(P<0.05);在吉西他滨组中,Caspase-1和Caspase-4蛋白的表达量与NC组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:TNFα和吉西他滨诱导的胰腺癌细胞焦亡是通过Caspase-3/GSDME途径而非传统的GSDMD途径,并释放大量的炎症因子IL-1β和IL-18。
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