本研究以昆明白小鼠为材料，从624例小鼠胎儿中分离培养原始生殖细胞(Primordial Germ Cells)并进行传代克隆和鉴定研究，探讨了影响胚胎生殖细胞(EG细胞)分离与培养的因素，为建立昆明白小鼠EG细胞系奠定了基础，试验结果如下： 1．试验从7.5dpc～14.5dpc的昆明白小鼠胎儿分离培养原始生殖细胞，7.5dpc～9.5dpc取胎儿后1／3部分，包括原条后端和尿囊，10.5dpc～11.5dpc取泌尿生殖嵴，包括中肾和生殖嵴原基，12.5dpc～14.5dpc取生殖嵴，并克隆传代，最高传至第8代； 2．试验用分次消化法处理胎儿，对比不同的消化液对PGCs分离克隆的影响。0.125％胰蛋白酶+0.02％EDTA、0.05％胰蛋白酶+0.008％EDTA和0.25％胰蛋白酶+0.04％EDTA，三组消化差异不显著(P＞0.05)，都可以用于消化分离小鼠胎儿生殖嵴及复合物来获得PGCs； 3．试验比较了不同的培养系统：饲养层添加白血病抑制因子(LIF)，饲养层不添加细胞因子，饲养层添加大鼠心肌细胞条件培养基，结果是SD大鼠心肌条件培养基能够较好地用于分离培养昆明白小鼠PGCs，与添加LIF组差异不显著(P＞0.05)，但明显好于未添加细胞因子组，可以用于昆明白小鼠PGCs的分离培养； 4．试验比较了不同传代方法对小鼠胚胎生殖细胞(EG细胞)传代的影响，发现“手工传代”和“连同成纤维细胞一起消化”相比获得了较高的传代比率(P＜0.05)，手工传代“消化+连续离散”有利于保持传代细胞的增殖活力，尤其适合于EG细胞的后期传代； 5．试验比较了取胎儿身体后1／3部分共培养、生殖嵴共培养、“差速贴壁”培养和穿刺生殖嵴4种分离PGCs的方法对EG细胞分离克隆的影响，结果表明：生殖嵴共培养和差速贴壁方式获得了较好的分离效果(P＜0.05)； 6．对所分离的EG细胞经形态观察、AKP染色、体外分化能力检测，证实其符合小鼠EG细胞的一系列特征。