第一章绪论　　 感染石的药物治疗有三大环节：控制尿路感染、促使尿液酸化和抑制脲酶产氨。然而，目前的药物仅能作用其中的一环，且因需要长期应用故其副作用尤为明显。例如，(1)长期大量应用抗生素控制尿路感染易使细菌产生耐药性或菌群失调，甚至产生。肾毒性；(2)酸化尿液目前常用的药物是氯化铵，有助于磷酸铵镁结晶的溶解，但其缺点是长期使用可引起代谢性酸中毒；(3)作为唯一脲酶抑制剂的乙酰氧肟酸虽可抑制产氨，但因其副作用较大，且部分感染石患者本身的肾功能已经下降，这将进一步增加药物的毒性反应和降低疗效，故难长期使用。因此，临床上一直希望能够找到一种对于感染石疗效理想、且能长期使用，同时又能避免严重不良反应的疗法。　　 美国在1996年开始大规模研究功能性食品，最为突出的例证就是2004年2月，美国国立卫生研究院下属四个研究所资助九项基金用于研究当地果品蔓越莓对泌尿道感染的防治作用。蔓越莓因其具有“药食两用”的特性，深受患者的欢迎，从而引发了全球对功能性食品的广泛研发。而我国的青梅有机酸含量在4.096-6.5％，远远高于一般水果，故有可能成为“中国的蔓越莓”。在理论上，青梅含有的化学成分会使尿液酸化，而且可能兼有控制尿路感染和抑制脲酶产氨的潜力，有可能成为现有感染石药物疗法的补充或替代。　　 第二章感染性结石体内外模型的构建　　 目的:　　 为了深入研究感染石形成的机制，筛选抑制结石形成的中西药物并确认其临床药理作用，有必要建立合适的感染性结石的体内外模型。　　 方法:　　 (1)体外模型：　　 取100ml无菌玻璃试管，在超净工作台将人工尿液80ml转移至试管。将0.5麦氏浊度菌液0.8ml加入人工尿液，37℃孵育。于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、24小时分别取5ml试管内液体，取其中100ul液体，点于96孔板内，并以显微镜观察摄片。其余以紫外分光光度计检测OD600吸光度，记录读数。检测完的人工尿液低速离心(2000rpm10min)，取上清检测pH值，记录读数。24小时后离心收集晶体，0.05M pH8.6 Tris-HCl洗3遍，干燥后以红外光谱及及偏振光显微镜分析。　　 (2)体内模型：　　 SD雄性大鼠24只，分为3组。空白对照组：大鼠8只。每天普通饲料喂养(10 g/只)；膀胱内不置入任何异物。假手术组：大鼠8只。膀胱内不置异物，仅行无菌穿刺组。25％乌尔坦5ml/kg，腹腔注射麻醉。腹部皮肤去毛后1.5％碘伏消毒，铺无菌手术巾，麻醉满意后，取耻骨弓上方下腹正中切口，于下腹正中切开腹腔，提起膀胱，使用无菌G18穿刺针，于膀胱顶部穿刺入膀胱后直接退出，关闭腹腔，术后六小时后，恢复饲料。实验组：大鼠8只。膀胱内置入含菌异物。25％乌尔坦5ml/kg腹腔注射麻醉，腹部皮肤去毛后1.5％碘伏消毒，铺无菌手术巾，麻醉满意后，取耻骨弓上方下腹正中切口，于下腹正中切开腹腔，提起膀胱，使用无菌G18穿刺针，于膀胱顶部穿刺入膀胱，经穿刺针内腔，使用推杆将两端打圆滑的长4mm，直径0.5mm有变形杆菌污染的聚乙烯管推入膀胱，关闭腹腔，术后六小时后，恢复饲料。以上各组动物白天均投以充足的普通饲料，自由饮水。　　 结果:　　 (1)体外模型：　　 在实验的第7小时，在光镜下可以见到结晶；第10小时可以肉眼下见到结晶。傅里叶变换式红外光谱分析为磷酸铵镁与碳酸磷灰石混合成分的结石；偏振光分析进一步证实了结石为磷酸铵镁与碳酸磷灰石。OD600值在5-6小时突然升高，pH值在6-8小时明显升高　　 (2)体内模型：　　 术后第14天，在假手术组、实验组及空白对照组中随机取3只，高剂量麻醉处死。假手术组和空白对照组中无结石生成，实验组每只大鼠膀胱内均有结石的生成。术后21天，余下大鼠以过量麻醉方法全部处死。假手术组和空白对照组中无结石生成，实验组每只大鼠膀胱内均有结石的生成。傅里叶变换式红外光谱红外光谱分析为磷酸铵镁与碳酸磷灰石混合成分的结石；偏振光分析进一步证实了结石为磷酸铵镁与碳酸磷灰石。　　 术后第14天与术后21天，正常组与假手术组肾脏输尿管肉眼观察无明显变化。假手术组膀胱组织在穿刺点局部稍有增厚。实验组的鼠双侧肾脏明显增大、质暗肿胀，肾表面可见数量不等的微小脓肿，个别肾脏可见较大脓肿突出肾脏表面，肾切面肾盂扩大，粘膜充血、肿胀，肾盂内可见脓性分泌物。输尿管肿胀，内见炎性分泌物。膀胱表面的粘液层被破坏，膀胱壁明显增厚，膀胱表面粗糙糜烂，散在溃疡，局部可见到粟粒样脓肿。膀胱内见结石样物质。肾脏病理学变化为肾小管肿胀，间质有单核炎细胞浸润，管形形成，管内有脓性分泌物，间质纤维化并部分肾小管萎缩。膀胱组织血管广泛性扩张充血，大量炎细胞浸润，并有组织细胞坏死。膀胱移行上皮呈广泛性增生。　　 小结:　　 (1)体外模型：　　 在Griffith法配制的人工尿液中，加入解脲酶细菌奇异变形杆菌，浓度约为106CFU/ml，可以成功产生感染性结石的体外模型。　　 (2)体内模型：　　 我们构建的感染性结石的动物模型设计是可行的，可以为进一步的基础实验，提供合适的动物的模型。通过大鼠感染石模型构建，观察尿路的病理变化发现，奇异变形杆菌等解脲酶细菌在形成感染石的同时，可以引起尿路组织学的损害。这些损害主要表现为膀胱炎和肾盂肾炎的病理变化。这些病理损害可能既是尿路感染所造成的结果，又参与了此后的结石的生成。　　 第三章青梅提取液的药理作用　　 目的:　　 为了探讨青梅提取液对感染性结石的防治作用，有必要对青梅提取液的主要成分进行相关的分析。有必要对青梅提取液的对肾脏的毒理作用进行相关研究。并观察青梅提取物是否具有抑制脲酶、抑菌及酸化尿液的作用。　　 方法:　　 (1)青梅提取液有效成分的探讨　　 G1969型高分辨率电喷雾电离-垂直引入反射式飞行时间质谱仪。不同极性青梅提取液2.5ml，放入25 mL带塞的三角瓶中。准确加入10 ml二氯甲烷-甲醇(体积比为1:4)混合溶剂，常温下超声振荡提取30min，静置15min，过滤，常温下经氮吹至干，加入2ml甲醇溶解，过0.45 m滤膜后作为供试样品溶液。此后应用高分辨率电喷雾飞行时间质谱仪检测。　　 (2)青梅提取物对MDCK细胞增殖活性的作用　　 取对数生长期的MDCK细胞，以0.25％胰蛋白酶消化单层培养细胞，以含10％血清的DMEM配成单细胞悬液，以每孔103-104细胞接种于96孔板中，每孔体积200μl。MDCK细胞在37℃，5％CO2培养1天后，加入药物(分别为酸性青梅、中性青梅及其各部位提取物)，酸性青梅提取液、中性青梅提取液每组终浓度分别为0.5％、0.16％、0.05％。各部位提取物终浓度也分别为0.5％、0.16％、0.05％。另设不加药物组为对照组。每孔加入5mg/ml MTT20μl，37℃继续孵育4h，终止培养。吸弃孔内培养上清液，每孔加入DMSO150μl，振荡10min。用全自动酶标仪在波长为490nm处测定每孔的吸光度值(OD)。　　 (3)青梅提取物抑制脲酶作用的研究　　 将25μl刀豆脲酶(0.2mg/m1)溶液，不同浓度(6.25％、12.5％、25％、50％、100％)酸性、中性青梅原汁或各部位提取物5μl加入96孔板，37℃孵育15分钟。55μl尿素缓冲液(0.01M K2HPO4·3H2O，1mM EDTA，0.01M LiCl2和100mM尿素)加入各孔。37℃准确反应30分钟。各孔再加入60μl酚试剂(1％w/v苯酚和0.005％w/v硝普纳)，60μl碱试剂(0.5％w/v NaOH，0.1％NaClO)，50分钟后630nm检测吸光度。　　 (4)青梅提取液的抑菌作用的研究　　 取96孔板，外周一圈加100μl生理盐水，其余每孔加入100N肉汤培养基，第一列6孔加入100μl青梅原汁(酸性或中性)或各部位提取物或阳参对照药1mg/ml阿米卡星，依次倍比稀释至下一列，最后一列不稀释留作不加药对照。考虑到青梅原汁具有一定的颜色，将最顶端一行孔留作不加菌对照。其余各孔加入2μ1菌液。37℃孵育过夜。第二日以肉眼观察各孔浑浊度情况，并以酶标仪600nm检测吸光度。以不浑浊孔最低浓度为最低抑菌浓度。各加药组吸光度值减去青梅背景值后，以与不加药对照吸光度相比下降超过90％的最低浓度为最低抑菌浓度。　　 (5)青梅提取液抑制奇异变形杆菌细胞粘附作用　　 将培养的犬肾细胞MDCK密度调节至0.5×106cell/ml，传代至96孔板。生长融合后，吸弃培养液，生理盐水轻柔冲洗。奇异变形杆菌以无血清DMEM培养液配制成浓度约为108CFU/ml备用。取96孔板，除周围一圈外，每孔加入200μl无血清DMEM培养基。第二列2-7孔加入4％青梅原汁或25％中性青梅原汁200μl。倍比稀释至第4列，第4列混匀后取200μl吸弃。则青梅原汁浓度依次为2％、1％、0.5％、0.25％，中性青梅原汁浓度依次为12.5％、6.25％、3.13％、1.56％。各部位提取物加药分为四组，浓度分别为25％、6.25％、1.56％、0.39％。　　 在第2、3、4、5、6列加入5μl菌液，则细菌终浓度为2.5×108CFU/ml。37℃孵育半小时。将孵育后的细菌药物混合液100μl对应的加入到96孔细胞板内，37℃孵育1小时。吸弃上清，以生理盐水轻柔冲洗3遍，加入酚红尿素溶液100μl，37℃孵育4小时后以酶标仪560nm读数。以不加菌液组为阴性对照，以不加药物组为阳性对照(粘附率为100％)，粘附率％=(OD实验-OD阴性对照)/(OD阳性对照-OD阴性对照)×100。实验重复三次。取6孔板，每孔置入干净无菌的玻片，以多聚赖氨酸包埋。后续实验步骤同1-5。吸弃上清，以生理盐水轻柔冲洗。玻片以2％戊二醛固定后送南京农业大学生科院电镜下观察摄片，观察细菌与细胞粘附的情况。　　 (6)青梅提取液酸化尿液研究　　 10只给予定量饲料及饮水饲养，每日以代谢笼收集尿液，检测pH值。大鼠pH值稳定后开始实验。第1日早8:00am给予生理盐水5ml作为对照，于0、1、3、5、7小时以挤压大鼠颈部的方法促大鼠排出尿液并检测pH值。第2日早给予低浓度青梅原汁并以水补足5ml，不同时间点收集尿液检测。休息两日后，给予中浓度青梅并检测。再清洗两日，给予高浓度青梅。各给药组不同时间点pH值与0时比较，采用配对秩和检验。P<0.05为有统计学意义。　　 结果:　　 (1)青梅提取液有效成分的探讨　　 根据所得质谱信息，经计算机用NIST98MS数据库检索与标准谱图对照、人工谱图解析并查对有关资料对基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较、分析和鉴定，确认了其中的部分化学成分(表1)。其主要成分涵盖了酮、酸及酸酐、醛和酯等。常见的有机酸为枸橼酸；常见的醛为5-羟甲基-2-糠醛。(2)　　 (2)青梅提取物对MOCK细胞增殖活性的作用　　 中性青梅提取液对MDCK细胞存活率影响较小；酸性青梅提取液对MDCK细胞存活率有一定影响。尤其0.5％酸性青梅提取液组细胞的存活率下降至约50％(P<0.05)。石油醚，氯仿，乙酸乙酯，和乙醇提取物对MDCK细胞存活率无明显影响；0.5％正丁醇和水部位提取物对MDCK细胞存活率影响较大。其它浓度的正丁醇和水部位提取物对MDCK细胞存活率影响较小　　 (3)青梅提取物抑制脲酶作用的研究　　 酸性青梅及中性青梅对刀豆尿素酶均具有抑制作用，并且随着青梅浓度的增加抑制作用增强(图1)。通过酶动力学分析发现酸性青梅抑制似乎不属于竞争性、非竞争性或反竞争性，更多像是混合性的，可能是由于其成分复杂，多种成分具有脲酶抑制作用。采用不同极性溶剂分离得到的青梅各提取物中，极性小的石油醚和氯仿没有抑制脲酶活性。中等极性的乙酸乙酯和正丁醇具有脲酶活性抑制作用，5.88％浓度抑制率可达60％和67％(P<0.05)，但同样为中等极性的乙醇虽有抑制脲酶活性，但较乙酸乙酯和正丁醇的作用弱(5.88％浓度抑制率为44％，P<0.05)(图4)。强极性溶剂水的提取物抑制脲酶活性最强，5.88％浓度可达90％以上(P>0.05)。这表明青梅提取液主要的抑制脲酶活性成分主要为强极性(水部位)及中强极性的成分(乙酸乙酯和正丁醇极性部位)　　 (4)青梅提取液的抑菌作用的研究　　 酸性青梅汁对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为1.56％，对大肠杆菌的最低抑菌浓度为3.13％，对奇异变形杆菌的最低抑菌浓度为1.56％。对绿脓杆菌的最低抑菌浓度为1.56％。调节pH后的中性青梅仅在50％浓度时对绿脓杆菌有效。采用不同极性溶剂分离得到的青梅各提取物对奇异变形杆菌的作用中，极性小的石油醚和氯仿没有抑菌作用。中等极性的乙酸乙酯和正丁醇具有很强的抑菌作用，但同样为中等极性的乙醇基本无抑菌作用，仅在高浓度对奇异变形杆菌有抑制作用。强极性溶剂水的提取物与乙醇相似。　　 (5)青梅提取液抑制奇异变形杆菌细胞粘附作用　　 未加药组电镜下可见奇异变形杆菌与MDCK粘附。低浓度酸性青梅无明显抑制奇异变形杆菌粘附上皮细胞的作用。中性青梅浓缩汁能抑制奇异变形杆菌对上皮细胞的粘附作用，3.125％、6.25％、12.5％浓度粘附抑制率分别为、46.6、46.0及50.7％(P<0.05)。青梅提取液的六个提取物中，石油醚部位未发现明显抑制粘附作用；氯仿及乙醇部位提取物0.39-12.5％浓度作用后，粘附率出现升高现象；乙酸乙酯部位在0.39％及1-56％浓度时，粘附率上升，但在6.25％浓度时粘附率下降了22.4％；水部位同样在低浓度粘附率略有升高，在6.25％浓度粘附率下降；正丁醇部位在6.25％时粘附抑制率可达83.1％。　　 (6)青梅提取液酸化尿液研究　　 正常饮食的对照组尿液PH值维持在6.5-7.0之间，无尿液酸化的现象。各青梅组在给药后1小时后，均能酸化尿液，使尿液PH值下降至5.8以下(与0时比较，低浓度组：z=2.366，p=0.018；中浓度组：z=2.676，p=0.0074；高浓度组：z＝2.812，p=0.0049)。0.5％，1％的青梅组酸化尿液的作用时间短，约在3小时后，恢复至对照组的pH值水平。2％的青梅组酸化尿液的持续时间长，至少持续5小时左右，并使PH值维持在6.0以下(与0时相比，3小时：z=2.821，p=0.0048；5小时：z=2.546，p=0.0109)。7小时基本恢复(z=-0.675，p=0.4997)　　 小结:　　 (1)青梅提取液有效成分的探讨　　 青梅主要成分涵盖了酮、酸及酸酐、醛和酯等。常见的有机酸为枸橼酸；常见的醛为5-羟甲基-2-糠醛。　　 (2)青梅提取物对MDCK细胞增殖活性的作用　　 除0.5％正丁醇和水部位提取物对MDCK细胞存活率较大影响外，其它部位的提取物对MDCK细胞存活率无明显影响。　　 (3)青梅提取物抑制脲酶作用的研究　　 青梅抑制脲酶活性成分主要为水、正丁醇及乙酸乙酯部位。　　 (4)青梅提取液的抑菌作用的研究　　 采用不同极性溶剂分离得到的青梅各提取物对奇异变形杆菌的作用中，极性小的石油醚和氯仿没有抑菌作用。中等极性的乙酸乙酯和正丁醇具有很强的抑菌作用。水及乙醇提取物仅在高浓度时对奇异变形杆菌有效　　 (5)青梅提取液抑制奇异变形杆菌细胞粘附作用　　 中性青梅提取物能抑制奇异变形杆菌对上皮细胞的粘附作用。青梅的六个部位提取物中乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位在特定浓度具有明显的抑制奇异变形杆菌粘附作用，醇部位和石油醚部位不具有抑制粘附作用。　　 (6)青梅提取液酸化尿液研究　　 大鼠对2％以下浓度的青梅均有很好的耐受性。0.5％，1％青梅组均能酸化尿液，但作用时间短。2％的青梅组不仅酸化尿液的持续时间长，而且酸化尿液作用稳定。　　 第四章青梅提取液对感染性结石的防治作用　　 目的:　　 通过前述建立的体内外感染性结石的模型来评价青梅的药效。并观察大鼠感染性结石的形成过程中，肾小管THP和热休克蛋白的表达情况。　　 方法:　　 (1)青梅提取物抑制尿感染性结石形成的体外实验　　 取6支100ml无菌玻璃试管，在超净工作台将一定量人工尿液及青梅原汁转移至试管，分组情况见表1。将0.5麦氏浊度菌液0.8ml加入人工尿液，37℃孵育。于0、0.5、1、2、3、4、5、6、8小时分别取5ml试管内液体，其中取100u1点于96孔板内，并以显微镜观察摄片。其余检测OD600及光度，记录读数。检测完的人工尿液低速离心(2000rpm10min)，取上清检测pH值，记录读数。24小时后离心收集晶体，0.05M pH8.6 Tris-HCl洗3遍，干燥后称重，并以红外光谱及偏振光显微镜分析成分。　　 (2)青梅提取物抑制大鼠感染性结石形成的体内实验　　 雄性SD大鼠40只，体重180～200g，分为6组。腹部皮肤去毛后1.5％碘伏消毒，铺无菌手术巾，耻骨弓上方下腹正中切口，长约1 cm，逐层切开腹壁进入腹腔，暴露膀胱，无损伤的钳提起膀胱两侧，使用无菌G18穿刺针，于膀胱顶部穿刺入膀胱，经穿刺针内腔，使用推杆将两端打圆滑的长4mm，直径1mm的变形杆菌污染的聚乙烯管推入膀胱，关闭腹腔。术后第二天即开始灌胃给药，给药周期二周。各组每日给药量如下：低浓度组青梅原汁0.5ml/100g/天；中浓度组青梅原汁1.0ml/100g/天；高浓度组青梅原汁1.5ml/100g/天。将每日剂量以水稀释到15ml，分三次灌胃给药。按D大鼠=D人*0.71/0.11换算，各剂量相当于70kg人饮用青梅原汁54.2ml，108.5m1，162.7m1，按市售果汁原汁含量一般为15％，则相当于70kg的人饮用市售果汁361.3ml，723.3ml，1084.7ml。　　 (3)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织T-H蛋白表达的影响　　 A.石蜡切片：切片厚度4-6mm，分别置于玻璃切片和多聚赖氨酸预处理玻璃切片上，烤干备用。B.脱蜡，60℃烤箱预热30min后，二甲苯脱蜡15min，两次。C.水化，依次置于100％，100％，95％，85％，75％乙醇，蒸馏水中水化处理10min。D.3％H2O2室温孵育15min后，1 x PBS冲洗3次。E.置于0.01M枸橼酸缓冲液(pH6.0)中煮沸15min，蒸馏水浸泡30min，1 x PBS冲洗3次。F.滴加兔抗T H P(H135)抗体(浓度1:120)，37℃温箱孵育60 min。G.滴加羊抗兔二抗37℃孵育30 min，1 x PBS冲洗3次。H.DAB显色，自来水反复冲洗。I.苏木素复染，封片。THP在髓攀升支粗段和远曲小管近段的上皮细胞表达：　　 ①免疫组化着色度0-33％评1分；　　 ②免疫组化着色度34-66％评2分；　　 ③免疫组化着色度67-100％评3分。　　 (4)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织热休克蛋白表达的影响　　 A.石蜡切片：切片厚度4-6mm，分别置于玻璃切片和多聚赖氨酸预处理玻璃切片上，烤干备用。B.脱蜡，60℃烤箱预热30min后，二甲苯脱蜡15min，两次。C.水化，依次置于100％，100％，95％，85％，75％乙醇，蒸馏水中水化处理10min。D.3％H2O2室温孵育15min后，1 x PBS冲洗3次。E.置于0.01M枸橼酸缓冲液(pH6.0)中煮沸15min，蒸馏水浸泡30min，1 x PBS冲洗3次。F.滴加兔抗T H P(H135)抗体(浓度1:120)，37℃温箱孵育60 min。G.滴加羊抗兔二抗37℃孵育30 min，1 x PBS冲洗3次。H.DAB显色，自来水反复冲洗。I.苏木素复染，封片。热休克蛋白在髓攀升支粗段上皮细胞表达；　　 ①热休克蛋白着色度≤5％评1分；　　 ②热休克蛋白着色度>5％≤50％评2分；　　 ③热休克蛋白着色度>50％评3分。　　 结果:　　 (1)青梅提取物抑制尿感染性结石形成的体外实验　　 0.5％酸性青梅能抑制溶液pH值升高，抑制溶液OD值升高。0.25％及0.13％浓度对溶液pH值无明显影响，在6小时及8小时能抑制OD值的升高。显微镜下可见，0.5％浓度青梅在8小时内能抑制结晶形成，0.25％及0.13％浓度酸性青梅能减缓结晶的形成。傅里叶变换式红外光谱分析为磷酸铵镁与碳酸磷灰石混合成分的结石。24小时后收集结晶干燥后称重，给药各组结晶重量均明显低于空白对照组(P<0.05)，阴性对照组无结晶生成。　　 各浓度中性青梅均不能抑制溶液的pH值和OD值，显微镜下可见0.5％浓度青梅组，结晶生成速度明显减缓，24小时高倍镜下给药组晶体形态不同于对照组。傅里叶变换式红外光谱分析为磷酸铵镁与碳酸磷灰石混合成分的结石。24小时后收集结晶干燥后称重，给药各组结晶重量与空白对照组无明显差别(P>0.05)，阴性对照组无结晶生成。　　 (2)青梅提取物抑制大鼠感染性结石形成的体内实验　　 造模术后第2-3天，对照组大鼠死亡2只，低、中、高浓度给药组各死亡1只，此后无死亡。死亡原因通过解剖考虑为重症尿路感染合并尿潴留所致。正常组与假手术组肾脏输尿管肉眼观察无明显变化。假手术组膀胱组织在穿刺点局部稍有增厚。膀胱内无结石形成。对照组大鼠双侧肾脏明显增大、质暗肿胀，肾表面可见数量不等的微小脓肿，个别肾脏可见较大脓肿突出肾脏表面，肾切面肾盂扩大，粘膜充血、肿胀，肾盂内可见脓性分泌物，有的肾切面可见微小脓肿或锥形炎症灶，肾皮质、髓质分界不清。输尿管肿胀，内见炎性分泌物。膀胱表面的粘液层被破坏，膀胱壁明显增厚，膀胱表面粗糙糜烂，散在溃疡，局部可见到粟粒样脓肿，部分融合成片。膀胱内有大量成形结石形成，结石质硬。　　 青梅低、中剂量组：两组的肉眼观察的病理形态变化相差不大。肾脏表面光滑，双肾有不同程度增大，肾包膜紧张减轻。纵切面可见肾盂扩张，粘膜充血，肾皮质、髓质分界模糊，有少量脓点。输尿管轻度肿胀。膀胱表面的粘液层大部分被破坏，膀胱壁增厚，少量糜烂，溃疡和脓肿。膀胱内有成形结石形成，结石质软。青梅浓缩汁高剂量组：双肾输尿管外观无明显改变。纵切面肾盂不扩张，局部粘膜充血，肾皮质髓质分界清。输尿管轻度肿胀，膀胱表面的粘液层有部分破坏。膀胱壁稍增厚，散在的糜烂和溃疡，无脓肿。膀胱内有不成形基质样结石形成。各组结石的重量相比较。正常大鼠组及假手术组均无结石形成。给药组结石重量均低于模型对照组(P<0.05)　　 (3)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织T-H蛋白表达的影响　　 在大鼠感染性结石的形成过程中，肾小管THP的表达明显增高。THP可能对感染性结石引起的肾脏组织病理性损伤具有一定的联系。青梅提取物的高剂量组可以降低肾小管THP的表达　　 (4)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织热休克蛋白表达的影响　　 在大鼠感染性结石的形成过程中，肾小管HSP70的表达并不增高。青梅提取物治疗感染性结石大鼠，对肾小管HSP70的表达存在一定的影响。　　 小结:　　 (1)青梅提取物抑制尿感染性结石形成的体外实验　　 高浓度酸性青梅提取物在体外实验中能抑制结晶的形成，同时不同浓度的青梅提取物对结晶形成的作用效果是不一样的。浓度高的可直接抑制，低的可以减缓结晶的形成的速度，从而表现为不同的结晶形态。中性青梅对结晶生成量无影响，但能减缓结晶形成的速度。　　 (2)青梅提取物抑制大鼠感染性结石形成的体内实验　　 青梅提取物能减少大鼠感染性结石的形成，并能减少因感染所造成的尿路组织病理性损害的作用，提示青梅对感染性结石有一定的预防作用。　　 (3)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织T-H蛋白表达的影响　　 在大鼠感染性结石的形成过程中，肾小管THP的表达明显增高。THP可能对感染性结石引起的肾脏组织病理性损伤具有一定的联系。青梅提取物的高剂量组可以降低肾小管THP的表达。肾小管THP的表达情况可以间接提示青梅提取物对感染性结石的治疗效果。　　 (4)青梅提取物对感染性结石模型大鼠肾组织热休克蛋白表达的影响　　 在大鼠感染性结石的形成过程中，肾小管HSP70的表达并不增高。青梅提取物治疗感染性结石大鼠，对肾小管HSP70的表达存在一定的影响，尤其青梅提取物的低剂量组在感染诱导结石后，可以促进肾小管上皮细胞的热休克蛋白的表达，促进尿路损伤的修复。