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目的:通过观察温和灸对动脉粥样硬化家兔血清脂蛋白胆固醇变化、病理组织形态、超微结构变化的干预效应,从AMPK-SIRT1-NFκB信号通路角度探讨温和灸干预动脉粥样硬化的可能作用机制。方法:新西兰纯种健康雄性家兔68只按编号随机分为两组:空白组(12只)和造模组(56只),造模组用高脂饲料喂养与免疫损伤方法进行造模,模型制备成功后再随机分为模型组(18只)、温和灸组(18只)、阻断剂组(18只)。空白组和模型组不采取任何处理措施,温和灸组于膻中、神阙、内关(双)、血海(双)行温和灸治疗,阻断剂组在温和灸基础上行腹腔注射抑制剂ex527。观察家兔一般情况,观察主动脉组织病理形态学和超微结构变化,测定家兔血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中TNF-α、VCAM-1、MCP-1含量;免疫组化测定AMPK、SIRT1、NF-κB阳性表达,RT-PCR、Western Blot测定主动脉组织AMPK、SIRT1、NF-κB mRNA和蛋白表达量。结果:1.一般情况:经温和灸治疗后,家兔活动情况、皮毛情况与大便形态明显改善,与模型组和阻断剂组比有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。2.病理组织变化:温和灸能减少泡沫细胞形成,减轻脂质沉积,改善AS病变,具有促进AS模型家兔血管内膜修复的作用。3.血脂水平变化:经温和灸治疗后,家兔血清TG含量明显降低,与模型组和阻断剂组比均存在统计学差异(P<0.01);家兔血清TC、LDL-C含量降低,与模型组和阻断剂组比均存在统计学差异(P<0.01,P<0.05);经治疗后血清HDL-C含量高于模型组、阻断剂组,但组间比较均无统计学差异(P>0.05)。4.炎性因子变化:经温和灸治疗后,家兔血清TNF-α含量降低,与模型组和阻断剂组比存在统计学差异(P<0.01,P<0.05);家兔血清VCAM-1含量明显降低,与模型组和阻断剂组比均存在显著统计学差异(P<0.01);家兔血清MCP-1含量降低,与模型组比存在显著统计学差异(P<0.01),但温和灸组与阻断剂比无统计学差异(P>0.05)。5.AMPK光密度值、mRNA和蛋白表达的变化:经温和灸治疗后,家兔AMPK光密度值增加、AMPK mRNA及蛋白表达上调,与模型组和阻断剂组比存在统计学差异:AMPK的光密度值(P<0.001,P<0.05);AMPK mRNA(P<0.01,P<0.05);AMPK的蛋白表达(均为P<0.05)。6.SIRT1光密度值、mRNA和蛋白表达的变化:经温和灸治疗后,家兔SIRT1光密度值增加,SIRT1mRNA与蛋白表达量上调,与模型组和阻断剂组比存在统计学差异:SIRT1的光密度值(P<0.01,P<0.001);SIRT1 mRNA(均为P<0.01);SIRT1的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。7.NF-κB光密度值、mRNA和蛋白表达的变化:经温和灸治疗后,家兔NF-κB光密度值降低、蛋白表达量下调,与模型组和阻断剂组比存在统计学差异:NF-κB的光密度值(P<0.001,P<0.05);NF-κB的蛋白表达(均为P<0.01);温和灸治疗后,家兔NF-κB mRNA呈下调趋势,与模型组比存在统计学差异(P<0.01),但与阻断剂组比无统计学差异(P>0.05)。结论:1、温和灸可改善动脉粥样硬化家兔一般情况,对胆固醇代谢具有调节作用,对主动脉组织形态及超微结构有一定修复作用。2、温和灸可降低动脉粥样硬化家兔血清TNF-α、VCAM-1及MCP-1含量,减轻炎性损伤,促进内膜修复。3、温和灸可增强AMPK活性,促进AMPK基因及蛋白表达上调,激活能量开关,为温和灸产生生物学效应奠定一定基础;上调SIRT1含量,促进SIRT1 mRNA和蛋白表达上调,抑制炎症,促进内膜修复;降低NF-κB含量,下调NF-κB mRNA和蛋白表达,减轻内皮损伤。4、阻断剂干预后,SIRT1光密度值、SIRT1基因和蛋白表达下调,而NF-κB光密度值、NF-κB mRNA及蛋白表达量均升高,揭示温和灸抗动脉粥样硬化作用途径可能通过AMPK-SIRT1-NF-κB实现。