甜瓜乙烯信号转导途径关键因子CTR1基因的克隆及表达特性分析

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:huazhongtan
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在植物生长发育过程中,如植物种子的萌发、叶片的衰老和果实的成熟等,乙烯发挥着非常重要的作用。乙烯生理作用最终是通过其信号转导途径实现的。本实验从甜瓜果实中成功克隆了乙烯信号转导途径关键因子CTR1基因的cDNA序列,并分析了Cm-CTR1的表达特性。主要结果如下:1)利用RT-PCR技术从甜瓜果实中克隆得到甜瓜CTR1蛋白的cDNA序列,长度为2613bp,具有完整的开放式阅读框,编码870个氨基酸,推测相对分子质量为96.09KD,等电点为5.71。将得到的序列提交到GenBank,登录号为HQ848663。推测的甜瓜Cm-CTR1的氨基端序列中含有11个丝氨酸/苏氨酸激酶亚结构域,并含有ATP结合位点(位于562-569)和丝/苏氨酸蛋白激酶位点结构域(位于716-723),而且这两个亚结构域与拟南芥、番茄和月季的完全一致。通过用NCBI的BLASTP对Cm-CTR1氨基酸序列进行保守区分析,可得到6个保守结构域,分别是:Pkinase-Yyr区域;S-TKc区域;TyrKc区域;Pkinase区域;STYKc区域;SPS1区域。该序列与拟南芥、桃子、番茄等植物的CTR1氨基酸同源性为54.06-66.74%。2)实时荧光定量PCR分析结果表明,从授粉后第15天到20天,甜瓜果实Cm-CTR1基因表达显著增加,第20天的表达量是第15天的2.5倍,之后表达水平趋于稳定,第40天到45天表达量有所下降。
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