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金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)作为一种典型的超抗原具有极强的T细胞激活能力。本实验室在这一方面的前期研究已经有十多年的积累，获得了大量研究结果。前期研究证明，SEC2及其系列改构体具有极好的免疫细胞刺激能力，并通过直接作用于T细胞等非特异性免疫细胞，以免疫网络作用间接引起特异性免疫的激活。该特点暗示SEC2及其改构体具有作为疫苗佐剂、提升免疫系统对疫苗抗原的特异性免疫反应的潜力。因此，本论文试图研究SEC2作为疫苗佐剂的可行性，同时，从细胞和信号层面对其作为疫苗佐剂提升特异性免疫反应的机理进行分析。 狂犬病是一种致死性疾病，注射疫苗是当前预防狂犬病的最有效手段。目前商品化的狂犬病疫苗均为灭活病毒苗，其免疫原性较低，需要大量疫苗抗原多次免疫才能获得保护效果。而配伍佐剂则是提升疫苗抗原免疫原性的最常用手段。本研究以灭活狂犬病疫苗为对象，通过体内以及体外实验，分析SEC2作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。研究结果发现，SEC2为佐剂配伍狂犬病疫苗的实验组，通过腹腔注射的方式免疫的小鼠，其抗体滴度在第一次免疫后7天就显著高于单独注射疫苗的对照组，这种差异在第二次免疫后7天被进一步的扩大。同时，第二次免疫后7天的实验组小鼠的脾细胞中分泌IFN-γ以及IL-4的细胞的比例要显著高于对照组和空白组，脾细胞中上述两种因子的基因转录水平相比于空白对照组也表现出明显的上调。在致死性剂量的狂犬病病毒攻击下，经过为期14天的观察，实验组对小鼠的保护率也表现出明显的增强。上述实验结果证明SEC2确实具有作为狂犬病疫苗佐剂的潜力。 进一步的机理研究表明，对于在疫苗免疫中具有重要抗原提呈作用的树突状细胞(DC)，SEC2可明显刺激未成熟的骨髓来源DC细胞(BMDC)的成熟，上调细胞表面信号分子CD80、CD86和MHCII的表达。ELISA检测发现SEC2可剂量依赖性的诱导BMDC分泌促炎性细胞因子IFN-γ，TNF-α和IL-6，并伴随着其mRNA转录水平的显著上调。此外，SEC2还可诱导BMDC细胞表面重要模式受体TLR2、TLR4的表达，显著激活其下游信号通路转导分子MyD88的上调，并进一步引起IκBα短时间内磷酸化，导致p65蛋白的快速入核，从而激活NFκB信号通路。NFκB特异性抑制剂Bay11-7085可显著抑制SEC2诱导的BMDC产生IFN-γ，TNF-α和IL-6三种细胞因子。以上研究结果表明，SEC2可通过TLR-NFκB信号通路刺激BMDC的成熟，从而增强了DC细胞对疫苗抗原的抗原提呈效果，发挥了疫苗佐剂的作用。