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目的:通过分析腹腔镜和开腹全子宫切除手术患者术前、术后血清中内皮细胞损伤标志物内皮素-1(ET-1)的变化,并将其在体外作用于人脐静脉内皮细胞株ECV304,观察两种情况下细胞形态的变化,测定作用不同时间点时ET-1的浓度改变,从而探索腹腔镜手术二氧化碳气腹等因素对受术者内皮细胞功能影响的可能性,为腹腔镜手术是否造成内皮细胞的损伤,为防止术后深静脉血栓的形成提供一定的理论依据。方法:收集2009年1月-2009年4月在扬州市第一人民医院行妇科腹腔镜及经腹全子宫切除手术患者的术前术后血清,两组病例各19例,年龄体重无统计学差异,均无内科合并症及血栓的高危因素,胸片、血尿常规、肝肾功能正常。围手术期未使用止血药物及抗凝剂,就病例的一般情况行均衡性检验,如:体重指数、子宫体积、盆腔粘连情况等。并征得患者知情同意。预实验:用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA法)测定试验前期8名患者的灭活、未灭活血清中内皮素-1的含量,确定未灭活血清为实验标本来源。1.选取行腹腔镜全子宫切除术19例,同期经腹全子宫切除术19例,分别于麻醉后手术前及手术结束时抽取静脉血,测定其血清中内皮素-1(ET-1)含量变化,观察在二氧化碳气腹下腹腔镜手术及经腹手术对内皮素-1的影响。2.选取腹腔镜全子宫切除术及经腹全子宫切除术患者各8例,将其术前术后血清作为介质,作用于体外培养的ECV304细胞株,观察细胞形态的改变,并采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)法测定作用不同时间点的细胞液中内皮素-1(ET-1)含量变化。所有研究结果数据以均数±标准差(ˉx±s)表示,计量资料采用配对样本t检验,独立样本t检验,单因素方差分析,多个样本均数的方差分析(F检验)。实验结果采用SPSS17.0软件包进行统计学分析。结果:1.同一患者术前术后未灭活血清、灭活血清中内皮素-1的含量,差异无统计学意义(P>0.05)。2.腹腔镜组以及开腹组自身术前术后比较显示:两组术后血清中内皮素-1(ET-1)均有不同程度上升,但变化较小,差异无统计学意义(P>0.05)。3.不加血清的空白对照组中,ECV304细胞培养2、6、12、24小时后,其细胞培养液中ET-1的浓度变化差异无统计学意义(P>0.05)。4.腹腔镜组与开腹组术前术后血清加入ECV304细胞培养液后,培养2、6、12、24小时,其上清液中的ET-1浓度较干预前血清中基础ET-1浓度有所升高,但变化无统计学意义(P>0.05)。培养2h、6h时,细胞上清液中ET-1含量有明显增加,但无统计学意义(p>0.05)。培养12h时,ET-1含量变化较小。培养24h时,细胞上清液中ET-1含量有明显下降,但亦无统计学意义(P>0.05)。干预的不同时间各组间比较差异无统计学意义。5.腹腔镜组术前术后血清作用于ECV304细胞2、6、12、24小时后,相同作用时间的两组细胞培养上清液中ET-1含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。6.开腹组术前术后血清作用于ECV304细胞2、6、12、24小时后,经过相同作用时间,比较两组血清干预的细胞培养上清液中ET-1含量,差异无统计学意义(P>0.05)。7.ECV304细胞传代后呈梭形或多角形,铺路石状镶嵌排列,细胞边界清楚,胞浆丰富,胞核椭圆居中,核仁明显,具有血管内皮细胞的形态学特点。经血清作用24小时后,在倒置相差显微镜下观察,腹腔镜组和开腹组均有细胞变圆,细胞间隙增大,贴壁不牢及退缩脱落现象。结论:1.未灭活血清可代表灭活血清作为本试验的标本来源,简化实验流程。2.与经腹全子宫切除术相比,腹腔镜全子宫切除术不促进内皮素-1产生。3.腹腔镜及经腹全子宫切除术均不增加受术者血清对体外培养的内皮细胞合成内皮素-1的影响,且内皮素-1含量的变化与作用时间的长短无关。4.腹腔镜及经腹全子宫切除术患者的术前术后血清作用与体外培养的ECV304细胞24小时后,细胞形态发生改变,内皮细胞受损,说明血清中确实存在损伤内皮细胞的因素。