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本试验旨在研究饲料中添加不同水平大豆异黄酮(0、10、50、100、500、1000 mg/kg)对草鱼生长、免疫、抗氧化及瘦素信号通路的影响。结果表明:1、草鱼的末重、平均增重率、特定生长率与饲料效率随着大豆异黄酮添加水平的提高显著上升(P<0.05),在添加水平为100和500 mg/kg时显著高于对照组(P<0.05),在大豆异黄酮的添加量为100 mg/kg时草鱼的末重、平均增重率和特定生长率达最高水平,在大豆异黄酮的添加量为500 mg/kg时草鱼的饲料效率达最高水平。2、大豆异黄酮能提高草鱼的免疫功能。养殖试验后我们对草鱼腹腔注射嗜水气单胞菌,进行为期七天的攻毒试验。取草鱼脾和肾以荧光定量法检测各免疫基因的m RNA相对表达水平。结果表明随着大豆异黄酮添加水平的提高,攻毒前草鱼肾脏INF-γ2和IL-12p40 m RNA的表达水平呈现先上调后下调的趋势,在100和500 mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05)。攻毒后INF-γ和IL-12p40 m RNA表达水平呈现先上调后下调的趋势,INF-γm RNA在100和500 mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05),IL-12p40 m RNA在500 mg/kg组时有最高表达水平(P<0.05);攻毒前草鱼肾脏M-CSF2、IL-4和IL-6 m RNA在500 mg/kg组时表达水平最高且与对照组差异显著(P<0.05)。攻毒后M-CSF2、IL-4和IL-6 m RNA表达水平均呈现出先上调后下调的趋势,M-CSF2 m RNA在500 mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05),IL-6 m RNA表达水平在100和500 mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05)所有试验组IL-4 m RNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05),在500mg/kg组时有最高表达水平(P<0.05);攻毒前草鱼肾脏各组间TNF-αm RNA表达水平无显著差异。攻毒后TNF-αm RNA的表达水平呈现先上调后下调的趋势,在100和500mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05)。此外,我们还观察了草鱼脾脏各免疫基因在攻毒前后的m RNA表达,并取得了相似的试验结果。我们还研究了草鱼对嗜水气单胞菌抵抗能力的影响,我们发现添加大豆异黄酮的饲料能提高草鱼的嗜水气单胞菌抵抗能力,100和500 mg/kg组的存活率显著高于对照组(P<0.05)。在攻毒试验结束时,0、10、50、100、500和1000 mg/kg组鱼的7天累积存活率分别为47.92±5.51%、54.17±2.08%、56.25±3.61%、60.42±5.51%、64.58±2.08%和58.33±2.08%。3、大豆异黄酮能提高草鱼的血清与肝脏抗氧化能力,饲料中添加大豆异黄酮后,大豆异黄酮对草鱼肝脏与血清SOD活性均有显著的影响。草鱼的SOD活性随大豆异黄酮的添加水平提高呈现先上升的后下降的趋势,当大豆异黄酮的添加水平为500 mg/kg时,显著高于对照组(P<0.05);草鱼的CAT活性随大豆异黄酮的添加水平提高呈现上升趋势,当大豆异黄酮的添加水平为100-1000 mg/kg时,草鱼血清CAT活力显著高于对照组(P<0.05),在500 mg/kg组有最大值,当大豆异黄酮的添加水平为10-1000 mg/kg时,草鱼肝脏CAT活力均显著高于对照组(P<0.05),在100 mg/kg组有最大值;草鱼血清GSH-Px活力随着大豆异黄酮添加水平的增加呈现上升趋势,在50-1000 mg/kg时显著高于对照组(P<0.05),在100 mg/kg组有最高活力,草鱼肝脏GSH-Px活力随着大豆异黄酮添加水平的增加呈现先上升的后下降的趋势,在500 mg/kg组有最大值且显著高于对照组(P<0.05);草鱼血清AKP活力随着大豆异黄酮添加水平的增加呈现上升趋势,在100-1000mg/kg时显著高于对照组(P<0.05),在100 mg/kg组有最大值,大豆异黄酮对草鱼肝脏AKP的活力无显著影响。4、大豆异黄酮能影响由瘦素介导的JAK2-STAT信号通路,对其上下游基因的表达有显著影响。养殖试验结束后取草鱼脑和肠,以荧光定量法检测瘦素信号通路上各基因的m RNA相对表达水平,结果表明大豆异黄酮能促进草鱼脑瘦素(Lep)与肠道瘦素受体(Lep-R)的表达,随着添加水平的增加呈现上升趋势,当大豆异黄酮添加水平为100-1000mg/kg时草鱼脑Lep与Lep-R m RNA表达显著上调(P<0.05);大豆异黄酮能促进草鱼脑Lep-R的表达,各试验组的表达量均显著高于对照组(P<0.05),在大豆异黄酮添加水平为100 mg/kg时表达量最高,且显著高于其他组(P<0.05);大豆异黄酮能促进草鱼肠道JAK2、STAT1、STAT2、STAT3和Pep T1 m RNA的表达,且均呈现出先上调后下调的趋势,在100 mg/kg组时JAK2 m RNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。STAT1m RNA在100和1000 mg/kg组时表达量显著高于对照组(P<0.05),STAT2 m RNA在100和500 mg/kg组时表达量显著高于对照组(P<0.05),STAT1和STAT2均在100 mg/kg组时相对表达水平最高。STAT3与Pep T1 m RNA的相对表达水平在10-1000 mg/kg组时显著高于对照组(P<0.05),STAT3与Pep T1 m RNA分别在500和100 mg/kg组时相对表达水平最高。此外,我们对草鱼活体注射了不同水平的大豆异黄酮(0、4、6、8、10μg/g),发现短期大豆异黄酮刺激也会影响瘦素信号通路上下游基因的m RNA表达,且其m RNA表达模式与养殖试验结束后所测得的结果相似。