【摘 要】
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血管活性肠肽(VIP)为一种由28个氨基酸组成的碱性神经肽类物质,属于胰泌素-胰高血糖素家族。VIP及其受体在动物体内分布广泛,几乎遍布各个组织,可介导多种生物学活性。VIP从发现到
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血管活性肠肽(VIP)为一种由28个氨基酸组成的碱性神经肽类物质,属于胰泌素-胰高血糖素家族。VIP及其受体在动物体内分布广泛,几乎遍布各个组织,可介导多种生物学活性。VIP从发现到深入研究已经历了四十多年,近几年来VIP在免疫和癌症治疗方面研究较多,目前有关VIP及其mRNA对机体生殖系统发育各个阶段的具体影响及其调控结果的系统研究报道较少。本研究旨在探明VIP及其mRNA在青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢和子宫内膜中分布的变化规律,为VIP在生殖系统调控和疾病治疗方面的进一步研究提供形态学依据。本试验采用免疫组织化学PV-9000两步法和原位杂交法分别从蛋白水平和基因水平上确定VIP及其mRNA在青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢和子宫内膜中的定位。结果:VIP及其mRNA的免疫阳性物质在四个时期小鼠卵巢内黄体细胞和卵泡中均有存在,黄体细胞的阳性表达部位主要集中在细胞质,在细胞核和细胞膜不发生免疫阳性反应;卵泡的阳性表达部位主要集中在卵泡内膜和卵母细胞膜上,卵母细胞的细胞质和细胞核不发生免疫阳性反应,并且除青春期外,其它三个时期内卵巢颗粒细胞也有免疫阳性物质存在,且主要集中在细胞质,细胞核和细胞膜没有免疫阳性反应。通过单因素方差分析表明在小鼠卵巢内,VIP及其mRNA的免疫阳性物质在泌乳后期表达量相对于其它三期差异极显著(P<0.01)。VIP及其mRNA在四个时期内小鼠子宫内膜上皮细胞的细胞膜呈免疫阳性反应,细胞质和细胞核没有免疫阳性物质存在;内膜腺上皮细胞呈免疫阳性反应,细胞核没有免疫阳性物质存在;在基质细胞也呈免疫阳性反应,且细胞膜和细胞质均有免疫阳性物质存在。通过方差分析表明在小鼠子宫内膜中,妊娠期子宫内膜腺上皮细胞的表达量相对于其它三期,差异极显著(P<0.01)。根据以上结果得出结论,VIP及其mRNA在卵巢黄体细胞的表达部位主要集中在细胞质,卵泡的表达部位主要集中在卵泡内膜和卵母细胞膜上,并且除青春期外, VIP及其mRNA在其它三个阶段的小鼠卵巢卵泡的颗粒层细胞都有表达。在四个生理生理时期内,VIP及其mRNA在卵巢的表达部位基本相同,并且随着日龄的增加表达量呈上升趋势,泌乳后期表达量最大。VIP及其mRNA在四个时期小鼠子宫内膜上皮细胞、内膜腺上皮细胞、基质细胞均呈免疫阳性反应,并且在四个时期的小鼠子宫内膜细胞中,妊娠期子宫内膜腺上皮细胞的阳性表达量显著高于其它三期,且表达量最大。
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