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目的:CD147是一种广泛分布于细胞膜表面,与细胞增殖和侵袭相关的糖蛋白,能够刺激成纤维等细胞分泌基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase, MMPs)降解细胞外基质和基底膜而促进肿瘤的侵袭和转移。本实验旨在运用RNA干扰(RNA Interference, RNAi)技术沉默CD147基因表达,观察其对结直肠癌细胞株HT29的增殖、侵袭、转移及体内成瘤能力的影响。研究方法:1)化学合成CD147的干扰片段,并将其克隆至载体pYr-mir30-shRNA中,构建RNAi重组质粒;2)将重组质粒转染HT29细胞,G418筛选出稳定表达的细胞株;3)分别采用逆转录荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot法分别检测稳定表达细胞株中CD147、单羧酸转运蛋白1(Monocarboxy Latetransporter1, MCT1)和单羧酸转运蛋白4(Monocarboxy Latetransporter4, MCT4)的mRNA和蛋白表达;4)采用明胶酶谱法检测稳定表达细胞株中MMP-2和MMP-9的活性;5)采用CCK8法检测稳定表达细胞株的增殖能力及对顺铂的敏感性;6)采用Transwell法检测稳定表达细胞株的侵袭能力;7)构建皮下移植瘤裸鼠模型,观察稳定转染细胞株在体内的成瘤能力;结果:1)成功构建含EGFP和CD147干扰片段的重组质粒;2)用G418筛选出了稳定表达CD147干扰质粒的细胞株;3) qRT-PCR法和Western blot法检测的结果显示干扰后HT29细胞中CD147、 MCT1的mRNA和蛋白质表达量均显著降低(P<0.01), MCT4的mRNA和蛋白质含量无显著改变(P>0.05);4)明胶酶谱法显示:干扰后细胞MMP-2和MMP-9的活性均显著降低(P<0.01);5)CCK8结果显示:在培养24h、48h、72h和96h后,干扰组细胞的增殖能力较对照组分别下降至51.03%(P<0.01),54.26%(P<0.01),51.92%(P<0.01)和69.94%(P<0.01);6) Transwell结果显示:干扰组的穿膜细胞的数目(24.8±5.14)相对于对照组(79.3±4.95)显著降低(P<0.01);7)皮下移植瘤裸鼠模型实验结果显示:干扰CD147的表达可提高HT29细胞的凋亡水平,抑制结直肠癌细胞的生长。结论:RNAi沉默CD147可显著降低MCT1表达并降低MMP-2和MMP-9的活性,从而抑制HT29细胞的增殖、侵袭及裸鼠体内成瘤能力,并增强HT29对顺铂的敏感性。上述结果提示CD147可作为结直肠癌靶向治疗的新靶点,为结直肠癌的基因靶向治疗提供了新思路。