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目的本课题通过建立不同碘营养状态的大鼠模型,了解不同碘营养状况对大鼠甲状腺鼠类肉瘤滤过性毒菌(V-raf)致癌同源体B1(BRAF)基因甲基化的影响,探讨碘是否通过BRAF基因甲基化影响BRAF的表达。方法40只SPF级雌性SD大鼠,随机分为5组,分别为低碘组(LI,n=8)、适碘组(NI,n=8)、5倍高碘组(5HI,n=8)、10倍高碘组(10HI,n=8)和20倍高碘组(20HI,n=8),通过饮用不同碘含量的去离子水并喂养低碘饲料造模。期间收集大鼠24小时尿液测定尿碘,3个月后处死大鼠,留取血标本和甲状腺组织标本,采用化学发光法测定大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平,应用硫化测序PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP)分析启动子区CPG岛基因甲基化,应用免疫组化技术测定BRAF蛋白表达。结果(1)大鼠24小时尿碘水平结果显示:5组大鼠尿碘中位数与碘摄入量呈正相关,提示造模成功,但与适碘组相比,5倍、10倍、20倍高碘组尿碘中位数并未达到相应的倍数差。(2)甲状腺激素水平测定结果显示:在5组大鼠中,适碘组的血清FT3最高,低碘组和各高碘组血清FT3浓度较低,差异有统计学意义(P<0.05);低碘组与各高碘组比较,血清FT3水平无明显差异;与适碘组比较,低碘组和各高碘组血清FT4略增高,差异无统计学意义(P>0.05);大鼠血清TSH各组间比较低碘组、适碘组、各高碘组的血清TSH水平差异无显著性(P>0.05)。(3)BRAF基因甲基化结果显示:比较5组大鼠BRAF基因甲基化率,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)免疫组化结果显示:5组间面积(AREA)、累积光密度(IOD)、光密度差值比较,低碘组、适碘组和各高碘组甲状腺组织中BRAF表达逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05)。两两比较(LSD法),与适碘组比较,低碘组甲状腺BRAF表达较低,各高碘组表达较高,差异有统计学意义(P<0.05);与5倍高碘组比较,10倍高碘组和20倍高碘组表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)碘过量或碘缺乏均可致碘营养障碍,不同碘摄入量可影响大鼠甲状腺激素水平。(2)碘影响大鼠甲状腺BRAF蛋白表达,但对BRAF基因甲基化没有明显影响,提示碘可能通过其他途径影响BRAF蛋白表达。