黄鳝(Monopterus albus)FSHβ,LHβ和垂体糖蛋白激素α亚基的cDNA克隆和表达的研究

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我们用RACE方法从黄鳝的垂体中得到了FSHβ、LHβ和垂体糖蛋白激素α亚基的全长cDNA。该FSHβcDNA全长609bp,含有363bp的开放读码框,编码120个氨基酸的多肽链。LHβ全长641bp,含有424bp的开放读码框,编码147个氨基酸的多肽链。垂体糖蛋白激素α亚基全长682bp,含有366bp的开放读码框,编码121个氨基酸的多肽链。氨基酸序列分析发现,FSHβ的成熟蛋白含有102个氨基酸,C-端比哺乳动物少4个氨基酸;LHβ的成熟蛋白含有124个氨基酸,C-端比哺乳动物少1个氨基酸,并与其它硬骨鱼相似。它们的成熟蛋白均形成6个分子内二硫键,氨基酸序列中都含有一个N-糖基化位点,并且该位点的糖基化在不同物种中是保守的。PGHα亚基成熟蛋白含有94个氨基酸,形成5个分子内二硫键,N-端比哺乳动物少1个氨基酸,与其它硬骨鱼相似。我们用FSHβ和LHβ特异性引物分别扩增了黄鳝部分基因组序列。结果表明无论是FSHβ还是LHβ,黄鳝与鲀鱼的内含子序列存在较大差异,而外显子之间的差异则不明显。黄鳝和鲀鱼的FSHβ亚基的基因组序列都只含一个内含子,含有两个外显子。LHβ亚基基因组序列都含有两个内含子,三个外显子。应用一步法RT-PCR结合Southernblot分析,我们研究了FSH和LH在黄鳝不同发育时期性腺的垂体中的表达情况。结果显示,性腺中在从雌性到雄性的性逆转过程中FSH的表达量逐渐升高。可能暗示性腺产生的FSH在雄性精子生成过程中起着重要的旁分泌或自分泌的调控作用。而LH在雌性性腺中表达量较高,在雄性性腺中表达量较低,在间性性腺中未检测到表达。垂体中FSH在雌性中表达量最高,雄性略高于间性性腺表达量。垂体中LH在间性中表达量最高,雌性次之,雄性最低。结果表明:垂体和性腺产生的促性腺激素都可能参与了黄鳝性腺逆转的调节,但是它们各自的生理功能需要进一步研究。  
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