芸薹属A组和C组染色体杂交获得新薹用蔬菜研究

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远缘杂交是对现有品种遗传改良的重要途径,为了获得新的蔬菜种质资源,试验选用芸薹属A和C染色体组中重要薹用蔬菜菜心和芥蓝,进行种间杂交,通过胚挽救、增殖分化、生根诱导、人工诱导染色体加倍技术,得到菜心与芥蓝的种间杂种,并对获得的杂种F1及其自交后代F2进行形态学、分子标记、花粉育性、细胞学、流式细胞仪倍性、商品性分析等鉴定,主要结果如下:1.以菜心作为母本,芥蓝作为父本,进行种间杂交,一部分胚珠在田间自然生长,种荚出现假膨大,未收获到种子;另一部分胚珠进行人工培养,设置8种胚挽救培养基;6个不同取材时间;4种增殖培养基;9种生根培养基;3种染色体加倍诱导处理方式。最终结果显示ERM4(MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+AC 1.0 g·L-1)出胚率最高,为26.32%,为最佳胚挽救培养基;杂交后第12d出胚率达到26.32%,为最佳取材时间;DM1(MS+6-BA 0.9mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1)增殖系数最高,为5.37,为最佳增殖培养基;RM4-2(1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1)生根率较高,为37.21%,生根时间最短,为8.33d,为最佳生根培养基;抽薹前以0.2%秋水仙碱溶液涂抹植株顶芽和叶腋连续5次的方法,幼苗成活率最高,诱导加倍率可达62.26%,为最适宜的染色体诱导加倍方式。2.对杂种F1代形态学鉴定结果表明,菜心与芥蓝种间杂种性状表现介于父母本之间,更多偏向母本菜心,为真杂种,花朵颜色与父本相同为白色,经染色体加倍诱导的植株,花朵较大,有花粉,能自交结实,未经诱导植株无花粉。3.对杂种F1的分子标记鉴定结果表明,36对引物中一对引物ccr19扩增出的条带在父母本间具有明显差异,用该引物检测36株杂种,30株同时包含父本和母本特异性条带,为真杂种,6株为假杂种,证明形态学鉴定存在误差。4.对杂种F1的花粉育性检测、染色体分析、倍性鉴定结果表明,20株可育株,花粉可育,柱头染色体数目为38条,为菜心(2n=20)和芥蓝(2n=18)的染色体数目之和,花药染色体数目为19条,为真杂种,A/C染色体组之间具有明显分界,荧光强度最高峰位置与四倍体油菜处于同一位置,确定为异源二倍体;10株不育株,花粉败育,柱头染色体数目为19条,荧光强度最高峰位置与菜心处于同一位置,为异源单倍体。5.对杂种F2的形态学表现和商品性表现鉴定结果表明,杂种植株形态学表现介于父母本之间,叶面没有蜡粉,叶尖未翻卷,偏向母本,叶色为深绿色,比母本略浓;基生叶叶形和叶面、叶柄着生1对小叶、主薹形状与颜色、主薹表面有蜡粉都更接近父本,花色与父本相同,大小介于父母本之间。杂种营养生长阶段表现明显的杂种优势。杂种单薹产量为50.13 g左右,与父母本表现相当,从定植到采收所需时间,需29 d,比母本菜心迟,但早于父本芥蓝,采收期持续时间为48 d,超过父母本,种间杂种表现出明显的杂种优势。
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