油菜籽叶绿素测定方法研究及应用

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我国是世界油菜生产和消费大国,油菜为我国第一大植物油源,我国年均油菜面积和总产居世界首位。菜籽中的叶绿素含量高低直接影响菜籽油品质和加工成本,因此日益受到育种家及油脂加工行业的重视。日本、加拿大、澳大利亚等国已将油菜籽中叶绿素的含量作为油菜籽分等分级的重要技术依据。菜籽叶绿素含量高,高温高湿加工时形成脱镁叶绿素,一方面会使菜籽油色泽加深,呈墨绿色,影响菜籽油外观品质,加工过程中脱色脱嗅工艺越复杂,加工成本越高;另一方面它是一种光敏剂,能引发自由基反应,促进油脂氧化反应,导致油脂酸败变质,稳定性大为降低,极大缩短了产品货架期。因此研究建立适合我国国情并与国际接轨的油菜籽叶绿素测定技术具有重要的现实意义。本文在对油菜籽中叶绿素的提取试剂、提取技术、检测仪器条件等进行了研究,建立了混合溶剂研磨提取,多波长分光光度法检测油菜籽叶绿素的方法,并利用所建立的方法,对2004-2006年全国油菜品质普查样品以及国外收集样品进行了叶绿素含量的测定,主要研究结果如下:1、通过对油菜籽叶绿素提取方式,样品的研磨细度、提取试剂、提取方式、提取时间、提取温度等提取条件及提取过程中叶绿素稳定性的系统研究,建立了溶剂研磨一紫外可见光谱联用技术测定油菜籽中叶绿素含量的检测技术标准方法。即样品研磨细度40目后,石油醚+无水乙醇混合溶剂提取叶绿素,专用不锈钢制提取管加入研磨钢珠,水平摇床震荡提取1小时,中速定性滤纸滤,625 nm、665 nm、705 nm分光光度计多波长测定吸光度值,计算叶绿素含量。在优化的实验条件下,叶绿素a的重现性(RSD)分别为1.62%,检出限(3d)为0.155 mg/L,回收率为94.4~98.0%,本方法已经作为农业行业标准颁布:NY/T1287-2007《油菜籽中叶绿素含量的测定(光度法)》,为油菜籽中叶绿素含量测定的提供了科学的依据。2、采用所建立的标准方法,对我国油菜主产区征集的120份油菜籽样品、加拿大、澳大利亚等油菜主产国征集的26油菜籽进行了检测,分析比较了我国不同种植区域、不同种皮颜色、国内外不同收获年份的油菜籽样品叶绿素含量,初步探明了油菜籽叶绿素含量分布与差异,冬油菜叶绿素含量1~10mg/kg,明显低于春油菜叶绿素含量10~40 mg/kg;品种的种皮颜色对叶绿素影响不大;而我国菜籽叶绿素含量明显低于加拿大、澳大利亚等国。本文还讨论了影响绿素含量测定的原因。
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