论文部分内容阅读
目的：通过观察不同浓度儿茶酚胺(catecholamines, CA)类药物对内毒素(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)活性、细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量以及血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)表达的影响,从而探讨不同浓度CA类药物在LPS诱导的HUVEC中作用。方法：1)取健康产妇自愿捐赠足月妊娠分娩的新生儿脐带,长约25-30cm,分离HUVEC,培养,传代,冻存,第3代的细胞用于实验；2)以LPS诱导的HUVEC为研究对象,通过噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliu, MTT)实验方法检测不同浓度的CA类药物对HUVEC活性变化情况；3)以LPS诱导的HUVEC为研究对象,运用酶联免疫分析法(Enzyme-LinkedImmuno Sorbent Assay, ELISA)检测不同浓度CA类药物对HUVEC内细胞上清液中TNF-α含量变化；4)以LPS诱导的HUVEC为研究对象,运用蛋白质印记(Western Blot)方法检测不同浓度CA类药物对HUVEC内VE-Cadherin的表达。结果：1.LPS刺激HUVEC后,细胞活性降低,且呈浓度时间依赖趋势；2.正常情况下,多巴胺(DA)(1-10μM)或去甲肾上腺素(NE)/肾上腺素(E)(0.1-1μM)对HUVEC活性无明显影响(P>0.05),但随着CA药物浓度增加(DA>100μM; NE、E>10μM),细胞活性显著降低,细胞上清液中TNF-α含量增加,VE-Cadherin的表达减少。3.LPS诱导下,DA (1-100μM)和NE、E (0.1-10μM)能拮抗LPS对细胞的损害作用,但随着药物浓度增加(DA>100μM; NE. E> lOμM), HUVEC活性显著降低,细胞上清液中TNF-α含量增加,VE-Cadherin的表达减少。结论：1.进一步证实了LPS对HUVEC的活性有抑制作用；2.CA类药物(DA:1-100μM或NE/E:0.1-10μM)对LPS诱导的HUVEC起保护作用；3.CA类药物(DA:1-100μM或NE/E:0.1-10μM)可能通过降低细胞上清液中TNF-α含量、上调VE-cadherin的表达拮抗LPS致HUVEC的损伤,对细胞产生保护作用；3.CA类药物(DA>100μM或NE/E>10μM)对HUVEC产生药物毒性作用。