论文部分内容阅读
羊栖菜为马尾藻科马尾藻属植物Sargassum fusiforme(Harv.) Setch.,以干燥藻体全藻入药,主要功效为软坚散结、消痰、清凉解毒、破血祛淤、利水消肿,用于瘿瘤、睾丸肿痛、痰饮水肿。本文针对羊栖菜的药效物质羊栖菜多糖的提取、分离与纯化,组成成分,均一多糖的总糖含量、硫酸基含量、蛋白质含量、糖醛酸含量及均一多糖糖链结构进行了较系统研究,并对均一多糖的免疫调节活性进行了初步预试,取得以下主要结果: 1、采用水提醇沉法对羊栖菜多糖进行提取分离,并对其中SFPS65醇沉部位多糖通过凝胶柱层析进行纯化,得到SPSF65A和SFPS65B两个均一多糖。通过采用苯酚浓硫酸法、氯化钡明胶法、改良BCA蛋白质法、咔唑硫酸法分别对两个均一多糖进行总糖含量、硫酸基含量、蛋白质含量、糖醛酸含量的测定,初步表征了它们的组成成分。其中,SFPS65A化学组成为:总糖含量为67.5%,硫酸基含量为17.5%,蛋白质含量为5.2%,糖醛酸含量为41.1%; SFPS65B化学组成为:总糖含量为65.1%,硫酸基含量为2.7%,蛋白质含量为5.8%,糖醛酸含量为61.3%。 2、通过采用HPGPC、IR、比旋光度、PMP衍生化糖组成分析、甲基化分析、部分酸水解、核磁分析、LC-ESI-Q-TOF-MS分析等方法,对两个均一多糖SFPS65A和SFPS65B的理化性质及糖链的一级结构进行了研究,结果如下:SFPS65A主要由岩藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸、甘露糖、葡萄糖组成,其摩尔比为19.23∶9.58∶6.64∶6.54∶2.57∶1.00;SFPS65B主要由半乳糖醛酸、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖组成,其摩尔比为6.51∶3.04∶2.82∶1.00∶1.15。SFPS65A的糖链结构为→3,4)-β-Fuc-(1→3)-β-Fuc-(1→连接为主的硫酸化岩藻聚糖,糖链中还含有→3,4)-β-Fuc-(1→4)-α-Gal-(1→,→3,4)-β-Fuc-(1→3,4)-α-GlcA-(1→,→3,4)-β-GlcA-(1→4)-β-Xyl-(1→等片段,同时→3,4)-β-Fuc-(1→的3位取代位置上连接硫酸基。 SFPS65B的糖链结构为→4)-α-GalA-(1→4)-α-Fuc-(1→4)-α-GalA-(1→4)-α-Hex-(1→的杂多糖。以半乳糖醛酸为主,交替连接岩藻糖及半乳糖,甘露糖,葡萄糖,其中在2位取代的半乳糖上含有少量的硫酸基。 3、采用环磷酰胺免疫抑制小鼠模型对SFPS65部位多糖分离所得的两个均一多糖 SFPS65A和SFPS65B分别进行了体内免疫调节活性的初步研究,发现SFPS65A和SFPS65B两个均一多糖能明显地提高环磷酰胺免疫抑制模型的ICR小鼠胸腺指数和脾脏指数,且在剂量为100 mg/kg下均达到了显著的免疫增强活性(P<0.01)。