目的：香烟烟雾中含有多种有害化学物质，是多种疾病的主要诱因之一，而且被公认为是引起肺间质纤维化的重要危险因素。香烟烟雾中的氧化剂和自由基可通过多种途径产生氧化应激，大量证据表明氧化应激在肺间质纤维化的发病机制中扮演着重要的角色，无论是在急性发作期还是缓解期，病人均存在氧化／抗氧化失衡，然而其分子机制尚不清楚。在临床上肺间质纤维化尚无特效的治疗方法，近来抗氧化治疗引起许多学者关注，研究显示还原性谷胱甘肽（GSH）是机体内重要的还原剂，具有抗氧化作用，可清除自由基及其他活性氧簇，保护肺组织免受氧化损伤。因此本实验就以肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的A549细胞为模型，用不同浓度香烟提取物(cigarette smoke extract，CSE)刺激体外培养的A549细胞，观察细胞生长的形态学改变及增殖抑制情况。通过检测细胞上清液中各项氧化指标及反应纤维化程度的指标，来探讨吸烟对肺间质纤维化影响的可能机制以及还原型谷胱甘肽对吸烟引起的肺间质纤维化是否有逆转作用。方法：体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的A549细胞，取对数生长期的细胞进行试验。参照Carp and Janoff[1]的方法，通过特殊装置制备香烟提取物。抽吸2支去过滤烟嘴的香烟，把烟雾融入不含血清1640培养基中，调整PH值，并除去细菌和大颗粒，然后稀释至不同的浓度，30min中内用于试验。本实验首先尝试应用0%、2.5%、5%、7.5%、10%、12.5%浓度的香烟提取物培养液培养细胞，采用MTT法测定细胞活力，通过相差显微镜观察CSE对细胞增殖形态的影响。依据其结果选定合适的浓度进行实验分组。实验分为空白对照组、2.5%CSE组、5%CSE组、7.5%CSE组，7.5%CSE+GSH组(GSH1mmol/L).分别收集空白对照组和各干预组细胞培养24h小时后的上清液，应用比色分析法测细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛（MDA）含量，ELISA法检测细胞上清液中转化生长因子1(TGF-β1)的水平。结果：1倒置显微镜下观察A549细胞在不同浓度CSE作用下形态学变化倒置显微镜拍摄结果显示CSE作用后A549细胞生长密度减低，细胞之间空隙加大，漂浮细胞增多，贴壁细胞也呈回缩变圆的态势，出现萎缩，与对照组的细胞形态区别明显。2不同浓度CSE对A549细胞的生长抑制作用通过MTT比色法检测，CSE对体外培养的A549细胞有较强的增殖抑制作用，抑制作用呈剂量和时间依赖性。相同浓度香烟提取物不同时间（12、24、36h）作用后，随作用时间的延长其抑制率增大，差异有统计学意义(P<0.05)。相同时间不同浓度（0%、2.5%、5%、7.5%、10%、12.5%）香烟提取物作用后，随着浓度的增高其抑制率增大，差异有统计学意义(P<0.05)。在10%CSE组作用24h时抑制率达70.30±2.21%，在12.5%CSE组作用24h时抑制率高达90.10±1.01%。3不同浓度CSE对A549细胞上清液TGF-β1、MDA、SOD水平的影响不同浓度CSE组TGF-β1、MDA显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），且CSE浓度越高以上各因子含量越高，呈浓度依赖性，差异有统计学意义（P<0.05）。不同浓度CSE组SOD活性低于于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），且CSE浓度越高SOD活性越低，差异有统计学意义（P<0.05）。4GSH作用后A549细胞上清液TGF-β1、MDA、SOD水平的变化7.5%CSE+GSH组TGF-β1、MDA含量显著低于7.5%CSE组，差异有统计学意义（P<0.05），而SOD活性高于7.5%CSE组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1香烟提取物可抑制肺泡上皮细胞的生长，抑制作用呈剂量和时间依赖性。2香烟提取物可诱导肺泡上皮细胞分泌TGF-β1、MDA，使SOD活性下降，从而引起其氧化损伤及损伤后细胞修复变化。3还原型谷胱甘肽可以使CSE刺激后的A549细胞产生的MDA、TGF-β1减少，SOD增加，对吸烟引起的氧化损伤有一定逆转作用。