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目的:比较K562亲本细胞与K562/A02耐药细胞中SP细胞的比例,并分析K562、K562/A02细胞株及K562细胞株分选后的SP、NSP细胞亚群的周期、耐药蛋白、体外克隆培养以及相关基因的表达情况。从而进一步研究K562、K562/A02细胞株中SP细胞的生物学特性,探讨血液肿瘤的耐药机制以及SP细胞、肿瘤干细胞与多药耐药的关系。方法:采用MTT法测定耐药细胞及其亲本细胞对不同药物的敏感性;利用干细胞高效能将Hoechst33342荧光染料泵出细胞的特性,采用流式细胞仪检测K562细胞株与K562/A02耐药细胞株中SP细胞的比例,并分析K562、K562/A02细胞株及K562细胞株分选后的SP、NSP细胞亚群的周期、耐药蛋白（P-gp、ABCG2）、甲基纤维素克隆培养等生物学特性以及采用RT-PCR检测ABCG2、MDR1、SMO、BCR/ABLP210基因的表达情况。结果:所建立的多药耐药细胞系K562/A02对ADM的耐药指数为303.03±12.40,对EPI、VP16、VCR的耐药指数分别为48.08±2.11、45.25±2.63、40.10±3.26,表明其具有多药耐药的特性。经Hoechst33342染色,流式细胞仪分析结果显示,在K562及K562/A02细胞株中均存在SP细胞,分别为:2.7±0.5%、96.1±3.2%。K562敏感细胞株与K562/A02耐药细胞株相比,P-gp在K562/A02细胞株中显著表达为96.22±4.11%,统计学分析两细胞株中P-gp表达有显著差异,ABCG2在敏感细胞株及耐药细胞株中表达分别为:1.14±0.31%、3.51±1.22%,统计学分析无明显差异;两细胞株的细胞周期大部分均处于S/G2/M增殖期;体外克隆形成能力无明显差异。K562细胞株分选后的SP、NSP细胞亚群中P-gp表达分别为:2.22±1.71%、2.81±1.62%,统计学分析两细胞亚群无明显差异,而K562SP细胞亚群中ABCG2（28.23±1.67%）的表达明显高于K562NSP细胞（1.41±0.22%）,统计学分析两细胞亚群中ABCG2的表达有显著差异;分选后两细胞亚群周期结果显示:大部分SP细胞处于静止期,G0/G1期比例达82.71±3.12%,明显高于NSP细胞亚群;K562SP细胞成克隆能力明显强于K562NSP。RT-PCR检测K562/A02耐药细胞株中MDR1基因表达量明显高于K562敏感细胞株,两细胞株中ABCG2、SMO、BCR/ABLP210基因的表达量无明显差异;K562SP细胞亚群较K562NSP细胞亚群高表达ABCG2、SMO基因,而不表达BCR/ABLP210基因。结论:K562细胞株中存在一小群SP细胞,与NSP细胞相比,在耐药蛋白表达上有异质性,大部分处于静止期,体外集落形成能力较强,SMO基因表达阳性,Bcr/abl融合基因表达阴性,表明K562SP细胞中可能富含与白血病耐药、复发相关的白血病干细胞。K562/A02细胞株高表达SP表型、耐药蛋白P-gp,细胞周期大部分处于S/G2/M增殖期,体外集落形成能力较弱,推测K562/A02细胞株中的SP表型并非由干细胞外排染料的特性决定,而更多的是与获得性多药耐药性相关,并不富含肿瘤干细胞。推测耐药蛋白ABCG2对K562细胞株中SP表型起决定作用,而K562/A02细胞株中P-gp对其SP表型起主要作用。