三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen是一种传统的名贵中药材,与人参、西洋参等同为五加科人参属植物。三七总皂苷是三七中公认的活性成分,其中人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Re和三七皂苷R1含量较高,约占总皂苷的80%。这5种主要皂苷都因其骨架上连有较多糖基而表现出较大极性（也称极性人参皂苷）,导致其细胞膜透过性较差,生物利用度较低。大量研究表明小极性人参皂苷（稀有人参皂苷）如Rg3、Rg2、Rg5、Rk1、Rh1、Rh2等与含量较高的极性人参皂苷相比具有更强的生物活性。在众多体外转化方法中,微生物转化法可实现极性人参皂苷向小极性人参皂苷的稳定转化。但是具有丰富皂苷转化活性的天然菌株数量有限,用于制备多种小极性人参皂苷的微生物资源有待开发。因此本文对来自三七栽培土壤中的大量真菌进行了皂苷转化活性筛选、菌种鉴定、转化路径研究、胞外酶活性分析等工作,力求筛选到具有丰富而独特皂苷转化活性的菌株,将其应用于三七总皂苷的发酵转化,以制备多种小极性人参皂苷,文末还对活性真菌葡萄糖苷酶基因进行初步挖掘,为后续的基因重组表达做准备。具体的研究内容及结果包括以下几个方面:1、从分离自三七栽培土壤的真菌中筛选到一株具有明显皂苷转化活性的发菌科篮状菌属黄篮状菌Talaromyces flavus。2、T.flavus表现出的皂苷转化活性包括PPD和PPT型皂苷C-20位所有葡萄糖基和C-3位外部葡萄糖基的水解、C-20位羟基的差向异构化、C-20位羟基的脱水作用。3、本研究制备的T.flavus胞外粗酶只表现出水解PPD型皂苷C-20、C-3位外部葡萄糖基的活性。在较优的酶促反应条件p H 4.5,50℃下,人参皂苷Rb1可实现78.54?1.22%的转化率。分离纯化自胞外粗酶的葡萄糖苷酶分子量约为64 k Da。4、在提取时长1.5 h,以60%乙醇为溶剂,提取2次,提取温度为60℃,料液比1:14（g/m L）条件下三七总皂苷的提取率较高。在转化三七总皂苷时,粗酶孵育转化效果总体上较差,而T.flavus发酵转化效果总体上较好。三七主根在被T.flavus转化时,主要皂苷的转化率在32.55-47.48%,三七花在被T.flavus转化时,主要皂苷的转化率在44.16-55.22%。5、在扩增T.flavus中的葡萄糖苷酶基因时,虽扩增出一些长度近似的DNA片段,但测序比对结果并未显示这是葡萄糖苷酶基因,因此考虑后期采用转录组分析手段来进行功能基因的挖掘。