三七汽锅鸡对小鼠子宫复旧的作用效果及机制研究

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女性子宫在产后5~6周恢复至非妊娠时状态的过程称为子宫复旧。由于产褥期子宫创面较大,子宫在恢复过程中易伴随着产后恶露不绝、子宫内膜炎、子宫肌瘤等一系列的并发症。目前针对子宫复旧不全的问题,临床上主要采用手术及药物治疗。其中药物治疗虽能取得较好的效果,但同时易产生过敏反应以及胃肠道刺激、高血压等副作用。而加快子宫复旧可降低子宫复旧不全的几率。因此,加速子宫复旧进程对预防产后子宫复旧不良的发生至关重要。三七汽锅鸡是我国著名的药膳,在滇南地区,孕妇产后通常服用三七汽锅鸡以加速伤口愈合,补益元气。然而,三七汽锅鸡对子宫复旧的功效仅在民间流传,并未对其进行过系统的研究,作用机制亦不明确。因此,为验证并探明三七汽锅鸡促进子宫复旧的疗效及机理,本研究以产后小鼠为研究对象,利用网络药理学、药理学及分子生物学技术,研究了三七汽锅鸡对产后小鼠子宫复旧、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,综合评价了三七汽锅鸡对产后小鼠子宫复旧的疗效,同时对其相关机理进行了研究。该研究为三七汽锅鸡的产品开发提供了数据支撑,推动了云南省特色地方食品的发展。本研究主要结果如下:1.基于网络药理学探讨三七汽锅鸡促进子宫复旧的通路分析经网络药理学筛选得到三七汽锅鸡中共有9个活性成分,合并数据库信息,预测出三七汽锅鸡促进子宫复旧主要作用于ALB、AKT1、MMP9、EGFR、PIK3CA等50个靶点。结合GO与KEGG分析,发现这些靶点蛋白主要参与了蛋白质磷酸化的正调控,细胞凋亡的负调控等过程;三七汽锅鸡可能主要通过血管生成相关、PI3K/AKT等通路来促进子宫复旧。2.三七汽锅鸡促进小鼠子宫复旧的作用及方式以未生产过的小鼠为对照,以产后小鼠为模型,灌胃给予不同剂量的三七汽锅鸡,结果显示三七汽锅鸡能够降低产后小鼠子宫指数、子宫表面积、腹宽比,表明其可以促进子宫复旧。与模型组相比,三七汽锅鸡高剂量组(0.6 g/kg)显著降低小鼠血清中炎症因子含量(TNF-α、IL-1β)和免疫应答水平(Ig M、Ig A)(p<0.05),升高了激素和血管内皮生成因子(E、P、VEGF、PRL)水平(p<0.05);使子宫内膜明显增厚(p<0.05)。上调了细胞增殖、周期途径中PCNA、Cyclin D1的表达,胶原降解过程中MMP9的表达以及血管生成相关(VEGF、VEGFR2)蛋白和m RNA表达,使得磷酸化的PI3K、AKT、m TOR蛋白表达上调。结果表明三七汽锅鸡激活了PI3K/AKT/m TOR信号通路,通过降低小鼠体内炎症因子水平和免疫应答强度,升高激素和血管生成因子水平以及调控子宫内膜修复过程中相关因子的表达等多个途径来共同促进子宫小鼠产后子宫复旧。3.三七汽锅鸡促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的作用及方式通过CCK-8、细胞划痕实验得到三七汽锅鸡高剂量组(10-2 g/L)显著促进血管内皮细胞的增殖(p<0.01)和迁移;上调了VEGF、VEGFR2、PCNA、MMP9、Cyclin D1中蛋白和m RNA表达,并通过激活PI3K/AKT/m TOR信号通路来促进血管内皮细胞增殖。结果揭示了三七汽锅鸡可能通过上调VEGF的表达,促使其与VEGFR2相结合,进一步激活了PI3K/AKT/m TOR通路,升高核内PCNA、MMP9、Cyclin D1因子表达,使血管生成加快以增厚子宫内膜,进而加速子宫复旧。
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