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本研究采用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)技术构建了低盐胁迫诱导下凡纳滨对虾肝胰腺消减cDNA文库，对cDNA文库中差异表达序列标签(ESTs)进行同源比对、功能分类和鉴定分析，进一步对文库中差异表达的谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS)进行了全长克隆及序列分析，同时深入研究了低盐胁迫对凡纳滨对虾GS的时空表达、GS活性、谷氨酰胺含量、血淋巴氮代谢的影响。研究结果如下：1.低盐胁迫下凡纳滨对虾肝胰腺消减cDNA文库构建及差异ESTs分析文库中的克隆测序后获得162个有效ESTs，经CP3在线拼接后获得21contigs和110singlets，共131个非重复序列。比对结果显示，在131个非重复序列中，41个非重复序列与Genbank中的已知基因的序列有较高的同源性。根据GO(geneontology)分类法，所获得的41个非重复序列共分为7类，分别为蛋白质代谢及过程、碳水化合物代谢及能量产生、转运、细胞生长和凋亡、细胞防疫和体内平衡、信号转导及其他，所占比例分别为所占比例分别为27.5%、15.0%、17.5%、10.0%、12.5%、7.5%、10.0%。蛋白质代谢及过程类序列所占比例最高，其次为转运类序列。2.凡纳滨对虾谷氨酰胺合成酶的cDNA克隆及序列分析本实验根据消减cDNA文库中筛选获得的GS EST设计特异性引物，采用cDNA末端快速扩增法成功克隆了凡纳滨对虾GS cDNA全长序列，共计1455bp，包括56bp5′非编码区，1101bp阅读框以及298bp3′非编码区。阅读框共编码366氨基酸，分子量计算值为40.92kDa，理论等电点为6.34，氨基酸序列有两个模式位点，分别位于61-81aa和243-259aa。序列多重比对结果表明，凡纳滨对虾GS氨基酸序列有5处保守位点，与中国明对虾同源性达93%、与眼斑龙虾GS同源性达86%及与长牡蛎同源性达73%。采用NJ法构建的GS系统进化树表明，LvGS分类地位处于无脊椎动物支，与无脊椎动物亲缘性较近，与脊椎动物亲缘性较远。3.低盐胁迫对凡纳滨对虾GS表达量、活性、谷氨酰胺含量和氮代谢的影响低盐胁迫诱导下肝胰腺、肠、鳃和胃中GS mRNA表达量上调，心脏、肌肉和眼柄中GS mRNA表达量下调。低盐胁迫下，肝胰腺中LvGS表达量先升高后下降，LvGS表达量在6h、12h、1d和2d显著高于对照组(P<0.05)；肝胰腺中GS活性和谷氨酰胺含量有先升高后降低的趋势，与对照组差异不显著；血淋巴总蛋白和血氨有先降低后升高的趋势，与对照组差异不显著；血淋巴尿素氮有先升高后降低的趋势，低盐胁迫下3h和12h，血淋巴尿素氮显著高于对照组(P<0.05)；血淋巴尿酸有先升高后降低的趋势，低盐胁迫下3h、6h、12h、2d和3d，血淋巴尿酸显著高于对照组(P<0.05)。LvGS表达量、GS活性、谷氨酰胺含量、血氨、尿酸和尿素在低盐胁迫下7d-30d趋于恢复正常水平。