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目的近年的研究发现，红细胞数量、大小及功能改变是心血管疾病一个独立的风险因子。用七氟醚麻醉的患者术后外周血红细胞数会降低，我们推测是由于七氟醚对红细胞产生损伤所致。红细胞损伤后会出现两种典型病理情况，即衰亡（eryptosis）和坏死（necrosis）。衰亡的红细胞可被巨噬细胞识别、吞噬，使红细胞寿命缩短，严重时会引起贫血，发生溶血坏死时释放的游离血红蛋白（freehemoglobin，FHB）会清除一氧化氮（NO）使血管系统等功能受损，对组织器官十分有害。现已证实红细胞内存在有活性的内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）,能催化精氨酸与瓜氨酸的转换，并认为红细胞内的NO主要依赖eNOS产生。红细胞的功能和结构的完整性极易受内源性和外源性活性氧含量变化的影响，一直是实验室用于研究氧化损伤的理想而可靠的模型，我们利用该模型从红细胞抗氧化能力、红细胞NO代谢以及红细胞衰亡三方面考察七氟醚对人红细胞的影响，并探讨其机制。方法第一部分：不同浓度的七氟醚对人红细胞溶血率及其抗氧化酶的影响。从健康志愿者全血提纯红细胞，制备成2%红细胞悬液，使悬液含（mmol/l）：氯化钠145，氯化钾4，氯化钙2，葡萄糖5，PH=7.4。红细胞悬液分成8组（n=4）：空气组（A），1%七氟醚组（S1）、3%七氟醚组（S3）、5%七氟醚组（S5），空气+H2O2组（A+H组）、1%七氟醚+H2O2组（S1+H组）、3%七氟醚+H2O2组（S3+H组）、5%七氟醚+H2O2组（S5+H组），各组按上述浓度通醚，时间为30分钟，孵育15小时后，过氧化氢组加入反应浓度为200umol/L的过氧化氢，对照组加入等体积的林格氏液，各组继续孵育3小时。应用酶标分析仪检测红细胞溶血率，委托北京华英生物技术研究室检测红细胞内过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的含量。第二部分：不同浓度七氟醚对人红细胞内NO、NO2-、NO3-、iNOS和eNOS含量变化的影响。实验组设置及通醚方案同第一部分，委托北京华英生物技术研究室检测红细胞内NO、NO2-、NO3-、iNOS及eNOS的含量。第三部分：不同浓度七氟醚对氧化应激诱导人红细胞衰亡的影响。实验组设置：前8组设置同第一部分，增加以下8组：空气+高糖组（A+G组）、1%七氟醚+高糖组（S1+G组）、3%七氟醚+高糖组（S3+G组）、5%七氟醚+高糖组（S5+G组），空气+CaCl2组（A+C组）、1%七氟醚+CaCl2组（S1+C组）、3%七氟醚+CaCl2组（S3+C组）、5%七氟醚+CaCl2组（S5+C组），各组通醚时间为30分钟后置于恒温震荡培养箱中50rpm，37℃孵育15小时后，分别加入反应浓度为200umol/L的过氧化氢、反应浓度为600mmol/L的葡萄糖溶液、反应浓度为5mmol/L的氯化钙，继续孵育3小时，应用Annexin V荧光染色检测各组红细胞PS标记率及前向散射值（FSC）。结果第一部分：S3+H组溶血率（17.384±1.976）大于A+H组（10.848±0.274），P=0.007；S3+H组大于S3组（12.417±0.716）,P=0.027。A组过氧化氢酶含量（17.301±4.222）大于S3组（5.431±0.531），P=0.009；A组大于S5组（5.175±0.658），P=0.009；过氧化氢酶含量S1+H组（4.319±0.235）、S3+H组（8.257±1.389）、S5+H组（9.156±0.742）均较A+H组（13.689±2.003）明显降低（P<0.05）。S1+H组丙二醛含量（3.547±0.898）大于A+H组（2.654±0.509），P-0.031；S3+H组（4.474±0.653）大于A+H组，P=0.021。GSH含量：S3组（6.266±0.254）大于S3+H组（6.097±0.322）, P=0.018; A（7.335±0.106）大于S3,P=0.023; GSH-PX各组间均无显著性差异。第二部分：NO含量：A组（3.199±0.208）小于A+H组（3.622±0.262）, P=0.001; S1组（3.371±0.236）大于S1+H组（2.801±0.12）,P=0.003; S3组（2.808±0.244）小于S3+H组（3.372±0.261）, P<0.001; S5组（3.172±0.22）大于S5+H组（3.015±0.308）, P=0.039; A+H大于SI+H, P=0.002；NO-2含量：A组（16.731±0.434）与A+H组（17.334±0.969）,S1组（16.778±0.263）与S1+H组（17.709±1.547）, S5组（16.539±0.411）与S5+H组（16.397±0.35）,均无显著性差异，P>0.05; S3组（16.861±0.315）小于S3+H组（17.173±0.294），P=0.016；NO-3含量：A组（49.837±6.09）小于A+H组（65.000±4.173）, P=0.002,;S1组（55.128±3.676）小于S1+H组（64.736±2.326）, P=0.002; S5组（47.233±4.886）小于S5+H组（57.526±2.148）, P=0.005; S3组（55.779±11.342）与S3+H组（58.161±2.36）无显著性差异, P=0.642； eNOS含量：A组（1.403±0.103）小于A+H组（1.62±0.117）, P<0.001; S1组（1.503±0.107）小于S1+H组（1.23±0.075）, P=0.002; S3组（1.256±0.112）小于S3+H组（1.508±0.122）, P<0.001;S5组（1.414±0.097）小于S5+H组（1.349±0.133）, P=0.037; A+H组大于S1+H组, P=0.002；iNOS含量：A组（2.818±0.239）小于A+H组（3.215±0.224），P=0.001;S1组（3.002±0.208）大于S1+H组（2.495±0.106）, P=0.003; S3组（2.495±0.209）小于S3+H组（2.984±0.216）, P<0.001; S5组（2.818±0.203）大于S5+H组（2.659±0.284）,P=0.043; A+H组大于S1+H组, P=0.002.。第三部分：PS标记率： A（1.28±0.62）小于S3（2.803±0.516），A小于S5（3.1775±0.474），S1（1.5925±0.167）小于S3，S1小于S5，P<0.05；A+H（1.47±0.337）小于S3+H（3.1325±0.223），A+H小于S5+H（3.605±0.622），S1+H（2.225±0.357）小于S3+H，S1+H小于S5+H，P<0.05；前向散射值（FSC）： A（1239.27±59.701）大于S3（1065.3125±14.607），A组大于S5组（1060.385±26.493），S1（1244.3±88.409）大于S3，S1大于S5，S3大于S5,P<0.05； A+H（1185.868±51.738）大于S5+H（1059.733±12.06），P=0.025。结论：1、七氟醚可使人红细胞抗氧化能力降低，表现为对活性氧（H2O2）损伤的抵抗能力降低，溶血率增加，MDA含量增高。其机制与抑制红细胞过氧化氢酶活性、降低GSH含量有关；2、七氟醚抑制人红细胞NO生成，表现为NO含量下降，降低红细胞对活性氧（H2O2）应激损伤的耐受性，其机制与抑制红细胞内eNOS及iNOS活性有关，且iNOS的作用较eNOS显著；3、红细胞内存在有活性的eNOS及iNOS，且iNOS含量较高，在氧含量正常的情况下NO的产生主要依赖于此两种酶的活性；4、高浓度七氟醚可诱导人红细胞衰亡，表现为PS外露、细胞体积缩小，并可降低人红细胞对有害环境的抵抗能力；5、体外模型与体内环境差距较大，这些发现需要在临床上进行观察验证，以评估七氟醚麻醉潜在的危害。